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fairytale527

[交流] 求助重组蛋白量和抑菌活性不成正比是为什么?

我做重组蛋白表达

工程菌在37°C和25°C下诱导,在37°C下诱导记为L2,在25°C下诱导记为L3.
L2,L3的蛋白电泳,L2比L3的目标条带粗,蛋白表达量大,
抑菌圈活性,L2 比L3 抑菌圈小,
为什么会出现这种情况呢?
不是,表达量大抑菌圈也应该相对大吧。蛋白电泳图和抑菌实验结果不一致哦。

同一种蛋白不同温度下诱导,每个单位的蛋白活力会不一样?谢谢

L2,L3的蛋白电泳样品是超声波破碎后离心的上清。
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xiaoyur

金虫 (著名写手)

很正常了,量大可能是包涵体比较多,而包涵体多是无活性的蛋白,
相反,表达量少的可能有活性的蛋白较多.
爱的反义词不是恨 而是冷漠!
4楼2008-12-09 10:13:21
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huangyeke

铜虫 (正式写手)

★
fairytale527(金币+1,VIP+0):谢谢
为什么不纯化下再做抑菌实验呢?蛋白表达后直接破碎细胞做抑菌,这样杂质太多了,说不清楚
2楼2008-12-07 18:33:28
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)


★
fairytale527(金币+1,VIP+0):抑菌圈大小为什么不能反映蛋白活性的大小呢?不能定量也能定性吧,总能说明个趋势。
还有人在做重组蛋白的抑菌活性?


抑菌圈能反映蛋白活性的大小?


陆地上有抑菌作用的物质基本都找完了,做这个还有什么意义?很古老的课题,如果在一百年前还算有新意。

[ Last edited by hihoney on 2008-12-7 at 18:58 ]
3楼2008-12-07 18:57:42
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fairytale527

引用回帖:
Originally posted by xiaoyur at 2008-12-9 10:13:
很正常了,量大可能是包涵体比较多,而包涵体多是无活性的蛋白,
相反,表达量少的可能有活性的蛋白较多.

L2,L3是上清,
跑电泳的样品是上清哦
包涵体都在沉淀中,呵呵。
5楼2008-12-09 16:42:34
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