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hgq115

金虫 (小有名气)

[求助] 三种蛋白的分离

用单抗和荧光蛋白进行偶联标记,得到的产物里面含有单抗、荧光蛋白、单抗-荧光蛋白偶联物三种混合蛋白,分子量分别为150KD,100KD,250KD,尝试了用分子筛过柱纯化,因为样本量太少(100ul),回收效率非常差,请教还有什么方法可以对这个少量的蛋白混合液进行分离(100-200ul),且回收效率较好的方法?
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paramita09

木虫 (小有名气)

高级经理

引用回帖:
5楼: Originally posted by hgq115 at 2016-12-27 15:39:14
蛋白电泳会使蛋白变性,且含有三种混合蛋白,不能有效回收和分析标记效率吧?...

native PAGE, preparative CE或者HPLC都可以,有条件可以试试离子交换柱
踏入江湖是我命
9楼2016-12-27 20:04:56
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普通回帖

paramita09

木虫 (小有名气)

高级经理

踏入江湖是我命
2楼2016-12-08 21:38:02
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msiyuan

新虫 (正式写手)

3楼2016-12-08 22:03:16
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云淡风轻LAR

铁虫 (初入文坛)

4楼2016-12-17 13:51:11
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hgq115

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by paramita09 at 2016-12-08 21:38:02
电泳

蛋白电泳会使蛋白变性,且含有三种混合蛋白,不能有效回收和分析标记效率吧?
5楼2016-12-27 15:39:14
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hgq115

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by msiyuan at 2016-12-08 22:03:16
可用电泳

蛋白电泳会破坏蛋白结构,不能有效分析标记效率和回收吧?
6楼2016-12-27 15:40:40
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hgq115

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 云淡风轻LAR at 2016-12-17 13:51:11
用分子筛

分子筛尝试过了,样本量太少,分离后不能有效回收!
7楼2016-12-27 15:41:08
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paramita09

木虫 (小有名气)

高级经理

引用回帖:
5楼: Originally posted by hgq115 at 2016-12-27 15:39:14
蛋白电泳会使蛋白变性,且含有三种混合蛋白,不能有效回收和分析标记效率吧?...

native PAGE
踏入江湖是我命
8楼2016-12-27 19:57:18
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木子Jimmy

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by hgq115 at 2016-12-27 15:39:14
蛋白电泳会使蛋白变性,且含有三种混合蛋白,不能有效回收和分析标记效率吧?...

活性蛋白电泳怎么样呢?
10楼2016-12-31 11:43:39
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