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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 三种蛋白的分离
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hgq115

金虫 (小有名气)

[求助] 三种蛋白的分离

用单抗和荧光蛋白进行偶联标记，得到的产物里面含有单抗、荧光蛋白、单抗-荧光蛋白偶联物三种混合蛋白，分子量分别为150KD，100KD，250KD，尝试了用分子筛过柱纯化，因为样本量太少（100ul），回收效率非常差，请教还有什么方法可以对这个少量的蛋白混合液进行分离（100-200ul），且回收效率较好的方法？
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1楼 2016-12-08 20:50:44
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paramita09

木虫 (小有名气)

高级经理
引用回帖:
5楼: Originally posted by hgq115 at 2016-12-27 15:39:14
蛋白电泳会使蛋白变性，且含有三种混合蛋白，不能有效回收和分析标记效率吧？...

native PAGE, preparative CE或者HPLC都可以，有条件可以试试离子交换柱
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踏入江湖是我命
9楼2016-12-27 20:04:56
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普通回帖

paramita09

木虫 (小有名气)

高级经理
电泳
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踏入江湖是我命
2楼2016-12-08 21:38:02
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msiyuan

新虫 (正式写手)
可用电泳

发自小木虫Android客户端
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3楼2016-12-08 22:03:16
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云淡风轻LAR

铁虫 (初入文坛)
用分子筛

发自小木虫Android客户端
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4楼2016-12-17 13:51:11
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hgq115

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by paramita09 at 2016-12-08 21:38:02
电泳

蛋白电泳会使蛋白变性，且含有三种混合蛋白，不能有效回收和分析标记效率吧？
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5楼2016-12-27 15:39:14
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hgq115

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by msiyuan at 2016-12-08 22:03:16
可用电泳

蛋白电泳会破坏蛋白结构，不能有效分析标记效率和回收吧？
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6楼2016-12-27 15:40:40
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hgq115

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 云淡风轻LAR at 2016-12-17 13:51:11
用分子筛

分子筛尝试过了，样本量太少，分离后不能有效回收！
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7楼2016-12-27 15:41:08
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paramita09

木虫 (小有名气)

高级经理
引用回帖:
5楼: Originally posted by hgq115 at 2016-12-27 15:39:14
蛋白电泳会使蛋白变性，且含有三种混合蛋白，不能有效回收和分析标记效率吧？...

native PAGE
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踏入江湖是我命
8楼2016-12-27 19:57:18
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木子Jimmy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hgq115 at 2016-12-27 15:39:14
蛋白电泳会使蛋白变性，且含有三种混合蛋白，不能有效回收和分析标记效率吧？...

活性蛋白电泳怎么样呢？
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10楼2016-12-31 11:43:39
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