24小时热门版块排行榜    

查看: 1735  |  回复: 7

豆13

新虫 (小有名气)

[求助] PACYCDUET-1共表达表达量极低,如何解决 已有2人参与

我现在在做三个基因的共表达,一个放在PET22B上,一个放在PACYCDUET-1上,但是两个质粒共同转化筛选得到单克隆后,在PACYCDUET-1上的两个基因几乎没有表达,同实验室也有人做了PACYCDUET-1的转化,表达量也很低,不知道有没有大神做过PACYCDUET-1的转化,怎么操作会让蛋白表达更高一点呢
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WilliamHJ

金虫 (小有名气)

学习中
2楼2016-12-05 23:08:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (知名作家)


3楼2016-12-06 12:51:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

闲来小译

金虫 (正式写手)

我们实验室也这样,同样的两个基因,在pACYCDuet上共表达和在pET32a上双RBS表达,相差十倍。不知道什么原因。实在不行可以换其他共表达载体的。
4楼2016-12-08 09:54:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

PCR小王子

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主你好
我现在也想做多个基因共表达,查找文献得到的体系是pACYCDuet-1,petDuet-1.
你的问题会不会是两个载体不兼容引起的?
我这里有petDuet-1,可以跟你换pACYCDuet-1么?
5楼2016-12-08 10:20:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑色青春

铜虫 (小有名气)

请问楼主现在是如何解决这个问题的
6楼2017-03-21 16:08:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

In_vain

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


豆13: 金币+1 2017-10-09 16:29:43
pACYCDuet是单拷贝型的质粒,表达数量会很低,建议你用pRSTDuet或者pCDFDuet这两个质粒,都可以跟pET28a兼容,并且表达量高
7楼2017-08-17 10:01:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

莫落

木虫 (正式写手)

8楼2017-08-17 10:53:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 豆13 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +10 医学老男孩 2026-08-13 28/1400 2026-08-13 22:44 by 医学老男孩
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 28/1400 2026-08-13 17:51 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
请填处理意见