24小时热门版块排行榜    

查看: 1532  |  回复: 7

豆13

新虫 (小有名气)

[求助] PACYCDUET-1共表达表达量极低,如何解决 已有2人参与

我现在在做三个基因的共表达,一个放在PET22B上,一个放在PACYCDUET-1上,但是两个质粒共同转化筛选得到单克隆后,在PACYCDUET-1上的两个基因几乎没有表达,同实验室也有人做了PACYCDUET-1的转化,表达量也很低,不知道有没有大神做过PACYCDUET-1的转化,怎么操作会让蛋白表达更高一点呢
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WilliamHJ

金虫 (小有名气)

学习中
2楼2016-12-05 23:08:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (职业作家)


3楼2016-12-06 12:51:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

闲来小译

金虫 (正式写手)

我们实验室也这样,同样的两个基因,在pACYCDuet上共表达和在pET32a上双RBS表达,相差十倍。不知道什么原因。实在不行可以换其他共表达载体的。
4楼2016-12-08 09:54:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

PCR小王子

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主你好
我现在也想做多个基因共表达,查找文献得到的体系是pACYCDuet-1,petDuet-1.
你的问题会不会是两个载体不兼容引起的?
我这里有petDuet-1,可以跟你换pACYCDuet-1么?
5楼2016-12-08 10:20:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑色青春

铜虫 (小有名气)

请问楼主现在是如何解决这个问题的
6楼2017-03-21 16:08:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

In_vain

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


豆13: 金币+1 2017-10-09 16:29:43
pACYCDuet是单拷贝型的质粒,表达数量会很低,建议你用pRSTDuet或者pCDFDuet这两个质粒,都可以跟pET28a兼容,并且表达量高
7楼2017-08-17 10:01:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

莫落

木虫 (正式写手)

8楼2017-08-17 10:53:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 豆13 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +11 枫桥ZL 2026-03-18 13/650 2026-03-22 20:26 by edmund7
[考研] 289求调剂 +7 怀瑾握瑜l 2026-03-20 7/350 2026-03-22 15:57 by ColorlessPI
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 354求调剂 +7 Tyoumou 2026-03-18 10/500 2026-03-22 11:11 by 人来盛
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 初始318分求调剂(有工作经验) +3 1911236844 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:33 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300(化学)304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考博] 申博26年 +3 八6八68 2026-03-19 3/150 2026-03-19 19:43 by nxgogo
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
信息提示
请填处理意见