24小时热门版块排行榜    

查看: 1531  |  回复: 7

豆13

新虫 (小有名气)

[求助] PACYCDUET-1共表达表达量极低,如何解决 已有2人参与

我现在在做三个基因的共表达,一个放在PET22B上,一个放在PACYCDUET-1上,但是两个质粒共同转化筛选得到单克隆后,在PACYCDUET-1上的两个基因几乎没有表达,同实验室也有人做了PACYCDUET-1的转化,表达量也很低,不知道有没有大神做过PACYCDUET-1的转化,怎么操作会让蛋白表达更高一点呢
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WilliamHJ

金虫 (小有名气)

学习中
2楼2016-12-05 23:08:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (职业作家)


3楼2016-12-06 12:51:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

闲来小译

金虫 (正式写手)

我们实验室也这样,同样的两个基因,在pACYCDuet上共表达和在pET32a上双RBS表达,相差十倍。不知道什么原因。实在不行可以换其他共表达载体的。
4楼2016-12-08 09:54:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

PCR小王子

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主你好
我现在也想做多个基因共表达,查找文献得到的体系是pACYCDuet-1,petDuet-1.
你的问题会不会是两个载体不兼容引起的?
我这里有petDuet-1,可以跟你换pACYCDuet-1么?
5楼2016-12-08 10:20:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑色青春

铜虫 (小有名气)

请问楼主现在是如何解决这个问题的
6楼2017-03-21 16:08:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

In_vain

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


豆13: 金币+1 2017-10-09 16:29:43
pACYCDuet是单拷贝型的质粒,表达数量会很低,建议你用pRSTDuet或者pCDFDuet这两个质粒,都可以跟pET28a兼容,并且表达量高
7楼2017-08-17 10:01:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

莫落

木虫 (正式写手)

8楼2017-08-17 10:53:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 豆13 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 263求调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 4/200 2026-03-22 21:20 by 1144970272
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +11 梨花珞晚风 2026-03-17 11/550 2026-03-22 17:42 by luoyongfeng
[考研] 287求调剂 +8 晨昏线与星海 2026-03-19 9/450 2026-03-22 17:01 by i_cooler
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-20 3/150 2026-03-22 16:00 by ColorlessPI
[考研] 考研调剂 +4 来好运来来来 2026-03-21 4/200 2026-03-22 12:15 by 星空星月
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 4/200 2026-03-22 11:04 by 搏击518
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 278求调剂 +9 烟火先于春 2026-03-17 9/450 2026-03-21 17:47 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 303求调剂 +5 睿08 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:11 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕英一数二306 +7 z1z2z3879 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:48 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂,总分315(英一) +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 261求B区调剂,科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
信息提示
请填处理意见