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关于蛋白表达和Q柱纯化蛋白的问题 已有1人参与
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最近做一个脂肪酶野生型和突变型蛋白的纯化，载体采用组成型pgapzaa,表达菌柱x33,蛋白等点电预测5.65，采用先20mMTris-HCL平衡柱子,然后上样，接着再用20mMTris-HCL平衡柱子，接着用200mmolNaCL,20mMTris-HCL洗脱目的蛋白，最后用1MNaCL,20mMTris-HCL冲洗柱子. 整个操作过程出现一下现象: 删了3个氨基酸的突变体导致了另一个杂蛋白大量表达，这是怎么回事； 突变体纯化跟野生型一样的条件，但是蛋白挂不上去； 请大神帮我解决一下问题 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2016-11-30 15:33:36