应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 目的基因太大受体细胞无法表达怎么办？
81/1返回列表
查看: 1225  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

qs8lhy86

新虫 (初入文坛)

[交流] 目的基因太大受体细胞无法表达怎么办？ 已有3人参与

我的目的基因大小是1200bp左右，扩增，胶回收，酶切，连接质粒，层层验证都没问题。就是导入大肠杆菌中无法表达（没有抗性），请问是目的基因过大导不进去吗？是没有成功的可能性吗？我应该继续做吗？请求高人指点，感激不尽！

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-11-29 15:02:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

零点忧郁

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1200bp不算大， 应该还是转化的问题， 可以试试电转化
赞一下 回复此楼
2楼2016-11-29 19:06:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dissector

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
2500bp 在pwpi 上能表达出来，你用的是什么质粒，连接够酶切鉴定或者测序有没有问题

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-11-29 20:45:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qs8lhy86

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by dissector at 2016-11-29 20:45:20
2500bp 在pwpi 上能表达出来，你用的是什么质粒，连接够酶切鉴定或者测序有没有问题

我用的是BL21 大肠杆菌。连接验证没有问题。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-11-29 23:06:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qs8lhy86

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by qs8lhy86 at 2016-11-29 23:06:29
我用的是BL21 大肠杆菌。连接验证没有问题。
...

质粒是PET-28提的质粒。验证也没问题。。我觉得是BL21的问题？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-11-29 23:07:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qs8lhy86

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by dissector at 2016-11-29 20:45:20
2500bp 在pwpi 上能表达出来，你用的是什么质粒，连接够酶切鉴定或者测序有没有问题

质粒是PET-28提的质粒。验证也没问题。。我觉得是BL21的问题？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2016-11-29 23:11:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dissector

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by qs8lhy86 at 2016-11-29 23:11:05
质粒是PET-28提的质粒。验证也没问题。。我觉得是BL21的问题？
...

可以试一下换质粒，我这个原来师兄没表达出来，我换了一个质粒做出来，有可能就是原来的质粒坏了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-11-29 23:26:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1.2 kb的基因不算大，如果质粒大于10 bk倒是很难转化到细菌里
赞一下 回复此楼
8楼2016-12-01 16:17:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qs8lhy86 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 打过很多竞赛，085406控制工程300分，求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 316求调剂 +9 梁茜雯 2026-03-19 9/450 2026-03-25 23:01 by peike
[考研] 312求调剂 +5 上岸吧ZJY 2026-03-22 7/350 2026-03-25 22:20 by 544594351
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 282求调剂 +3 wcq131415 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:16 by userper
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 292求调剂 +4 鹅鹅鹅额额额额� 2026-03-24 4/200 2026-03-24 16:41 by peike
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料，材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 7/350 2026-03-24 11:23 by 种大树
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 化学308分求调剂 +3 你好明天你好 2026-03-23 3/150 2026-03-23 20:11 by macy2011
[考研] 070300，一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 288求调剂 +16 于海海海海 2026-03-19 16/800 2026-03-20 22:28 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭