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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » pET23b表达、纯化蛋白的问题
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Reasky

新虫 (初入文坛)

[求助] pET23b表达、纯化蛋白的问题 已有2人参与

老板给了我一个质粒pet23b，让我用来表达并纯化一个蛋白。
（质粒图谱见下）

我看这个质粒就是用普通的T7启动子来组成型表达目的蛋白，不需要用IPTG进行诱导表达了，对吗？
之前没有用这样的质粒来表达、纯化过蛋白，请问有什么要注意的吗？

pET23b表达、纯化蛋白的问题
pET-23b(+)_1x.png
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1楼 2016-11-24 10:12:11
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用这个质粒T7启动子做组成型表达，要看宿主的T7 RNA聚合酶的表达是否组成型表达。
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为什么
2楼2016-11-24 14:04:29
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Reasky

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 547star at 2016-11-24 14:04:29
用这个质粒T7启动子做组成型表达，要看宿主的T7 RNA聚合酶的表达是否组成型表达。

好的，谢谢。就打算用BL21来表达。还有什么要注意的吗？我是纯化蛋白的新手
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3楼2016-11-24 14:48:30
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enjoy大志

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

要用宿主菌种BL21(DE3)进行诱导表达的。
朋友，我现在甚是需要pet23b，您能否馈赠于我，或者我用别的质粒与您交换。
甚是需要。
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付出定有回报
4楼2017-06-19 19:59:11
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YLLB

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by enjoy大志 at 2017-06-19 19:59:11
要用宿主菌种BL21(DE3)进行诱导表达的。
朋友，我现在甚是需要pet23b，您能否馈赠于我，或者我用别的质粒与您交换。
甚是需要。

跪求pet23b的诱导经验啊，我一直诱导不出来啊
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5楼2019-09-14 21:30:33
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