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cghfdjkj

新虫 (初入文坛)

[求助] 高效液相色谱 已有1人参与

求助各位大神  按照药典方法的条件检测氢溴酸东莨菪碱  色谱柱C18 4.6mm*250mm,5微米,流动相为乙腈比磷酸盐缓冲液1:2,磷酸盐缓冲液配制为500mL水加无水磷酸钠7.74g,加十二烷基硫酸钠2.52g,标品用流动相溶解,流速1mL/min,紫外检测216nm,标品按药典二部鉴别方法鉴别没有问题,并做了核磁,纯度蛮高的,进样后就是如图的情况,最开始那个峰是溶剂峰,要的是14min的峰,请各位大神帮忙分析一下可能存在的问题,万分感谢。

高效液相色谱


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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品,天然产物分离纯化


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
离子对试剂一般要求比较长的色谱柱平衡时间,如果平衡不好,可能会出现楼主的这种情况,还有一个是否按照药典的方法溶解的样品
2楼2016-11-23 15:24:47
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祎祎祎祎祎超

新虫 (职业作家)

调一下流速吧,因为很明显峰分不开呀!还有就是平衡时间不够长,以至于上次实验的峰没完全出来……分离效果不好。实在不行抽抽泵试试,别经常抽

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我和谁都不争,和谁争我都不屑
3楼2016-11-23 15:33:00
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cghfdjkj

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 普思生物 at 2016-11-23 15:24:47
离子对试剂一般要求比较长的色谱柱平衡时间,如果平衡不好,可能会出现楼主的这种情况,还有一个是否按照药典的方法溶解的样品

色谱柱我平衡到基线平稳过20min就进样了 ,多长时间算比较长呢?标品我是按药典说的用流动相溶解的

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4楼2016-11-23 15:35:36
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cghfdjkj

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 祎祎祎祎祎超 at 2016-11-23 15:33:00
调一下流速吧,因为很明显峰分不开呀!还有就是平衡时间不够长,以至于上次实验的峰没完全出来……分离效果不好。实在不行抽抽泵试试,别经常抽

我这个是纯品啊~请问怎么抽泵?

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5楼2016-11-23 16:21:52
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祎祎祎祎祎超

新虫 (职业作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by cghfdjkj at 2016-11-23 09:21:52
我这个是纯品啊~请问怎么抽泵?
...

废液在里面没完全排出来,机器就代不动,跟纯不纯关系不是很大我觉得,因为那个流动相中的离子也能堵住柱子,所以,得打开泵,有按钮的按依次A.B.C.D按钮,要是没有按钮就得一边冲机子一边用针管对准抽泵,以至于泵压力减小

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我和谁都不争,和谁争我都不屑
6楼2016-11-23 16:26:37
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cghfdjkj

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 祎祎祎祎祎超 at 2016-11-23 16:26:37
废液在里面没完全排出来,机器就代不动,跟纯不纯关系不是很大我觉得,因为那个流动相中的离子也能堵住柱子,所以,得打开泵,有按钮的按依次A.B.C.D按钮,要是没有按钮就得一边冲机子一边用针管对准抽泵,以至于泵 ...

哦哦 好的  谢谢啦~

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7楼2016-11-23 18:18:42
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