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关于删除编码序列中ER 的HDEL作用 已有1人参与
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| 最近读了一篇文章,文中在烟草叶片中进行亚细胞共定位时,作者把内质网的hdel删除了,接着做了内质网的荧光蛋白定位 , 我很想知道删除hdel这一步是为什么, 是不是hdel会对含有信号肽的定位产生影响? |
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starseacow
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【答案】应助回帖
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_Unicorn: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-11-20 20:59:01
kuaile5420: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-23 20:51:13
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kuaile5420: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-23 20:51:13
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回答这个问题,你需要了解的是为什么在荧光蛋白上连接HDEL。 首先,荧光蛋白如GFP本身,在细胞中表达会显示弥散在细胞质内,没有特定表达位置。为了让荧光蛋白位于特定亚细胞位置,借鉴动物细胞研究的方法,首先在GFP上连接来自马铃薯块茎储存蛋白上的一个23个氨基酸长肽段 patatin使得GFP会被导向ER。接下来为了让 patatin-GFP能够一直留在ER内,又将KDEL及长春HSP90同系蛋白C端的七个氨基酸连在GFP的C端,这样形成的patatin-GFP-KDEL将一直在ER中。HDEL起类似作用。 一般来说删去HDEL,主要是在traffic研究中。patatin-GFP会从ER通过指向PM的转运途径运出胞外,这样的荧光信号可以用于标记一些和向细胞外转运的亚细胞器与途径。 |

2楼2016-11-20 20:37:38
3楼2016-11-20 21:13:44
starseacow
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