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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 关于酶切的问题
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shx0743

新虫 (正式写手)
除楼上所说的原因之外，你质粒的纯度如何，质粒的质量不好（严重变性）会严重影响酶切效果的！我之前提质粒溶液三有问题，所以每次提的质粒都过度变性，切不开，后来换了溶液三就没问题了，祝你好运！

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11楼2016-12-04 21:50:05
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yunyu818

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
12楼2016-12-19 11:42:35
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joeming123

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

把质粒纯化一下，可能是质粒中含有杂质， 抑制了酶切反应
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现在的路越来越难走
13楼2016-12-21 16:57:32
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1. AscI is strongly inhibited by NaCl and ammonium acetate. Therefore, we recommend using sodium acetate or potassium acetate as the salt for alcohol precipitation of DNA to be cut with AscI.


2. CpG Methylation: Blocked
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做一个阳光、开朗的小和尚
14楼2016-12-26 20:25:17
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seascen2016

新虫 (小有名气)
下次发帖把你的具体实验写出来，包括温度时间，载体量，用的哪个公司的酶，这样方便大家帮你分析。我以前用这个酶很好用的，你检查下是否buffer和酶有问题，酶切时间可以延长2-4小时，另外，载体的初始量不要太多，建议小于1ug。

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15楼2017-02-03 21:42:08
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