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MIDNA

铁虫 (小有名气)

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18楼: Originally posted by 664751146 at 2016-11-19 09:41:10
可能是DNA浓度太高了 ,之前我们也是 感受态、连接都没问题,怎么也长不出来,后来把DNA上样量从2.5改到了0.25—0.5ul 现在长得很好。

谢谢!
默默搜寻
21楼2016-11-19 23:08:18
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W生物化工

铁虫 (初入文坛)

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7楼: Originally posted by MIDNA at 2016-11-17 09:38:35
应该是质粒浓度太低,我想重新摇一下!大概需要多长时间??...

我们一般过夜摇16h
22楼2016-11-21 20:58:00
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Eccentric-

金虫 (小有名气)

引用回帖:
18楼: Originally posted by 664751146 at 2016-11-19 09:41:10
可能是DNA浓度太高了 ,之前我们也是 感受态、连接都没问题,怎么也长不出来,后来把DNA上样量从2.5改到了0.25—0.5ul 现在长得很好。

我的板子一个都不长,但阳性对照可以长,同源重组方法…

发自小木虫IOS客户端
23楼2016-11-23 00:27:57
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Eccentric-

金虫 (小有名气)

引用回帖:
18楼: Originally posted by 664751146 at 2016-11-19 09:41:10
可能是DNA浓度太高了 ,之前我们也是 感受态、连接都没问题,怎么也长不出来,后来把DNA上样量从2.5改到了0.25—0.5ul 现在长得很好。

你好,是转化时候的上样量吗?不太懂,可以解释一下吗?

发自小木虫IOS客户端
24楼2016-11-23 00:48:42
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yakun123

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
18楼: Originally posted by 664751146 at 2016-11-19 09:41:10
可能是DNA浓度太高了 ,之前我们也是 感受态、连接都没问题,怎么也长不出来,后来把DNA上样量从2.5改到了0.25—0.5ul 现在长得很好。

DNA上样量指的是质粒的转化量吗?新手请教
我师兄说质粒很好做电转,浓度在50-200之间的,只要加1微升就行,你说的0.25不会太少吗

发自小木虫Android客户端
25楼2016-11-24 01:25:18
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junior850621

铁杆木虫 (著名写手)

对的有一个就够了,错的一万个也没用。

发自小木虫Android客户端
26楼2016-11-24 01:49:07
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15272791472

新虫 (初入文坛)

有可能是感受态细胞的问题,也有可能是质粒浓度太低,还有就是可能冰浴时间过短或过长
27楼2016-11-27 20:00:53
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lhlhkla

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有一个是对的,总比满版都不是对的好
明媚角落
28楼2016-12-02 09:27:36
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xl8284

新虫 (初入文坛)

可能是链接效率太低,你可以试试把菌摇起来,集菌全涂。我以前也遇到这个问题,可以试试看
29楼2016-12-17 13:54:36
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奋斗狼

新虫 (初入文坛)

可能是你的转化效率不够高
30楼2016-12-24 10:46:54
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