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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 涂板子问题！
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MIDNA

铁虫 (小有名气)

[求助] 涂板子问题！ 已有10人参与

重组子转化大肠杆菌以后，进行涂板子，为什么做了好几次我的板子上的菌只长出了一两个！是什么问题？？？请各位师兄师姐赐教！
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默默搜寻
1楼 2016-11-17 08:10:19
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王方平

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果是自己做连接和转化，那么最好是控制一下DNA与Vector的混合比例以及连接酶的使用量。然后就看感受态的效率以及后面的孵育了，这种情况下建议孵育时间加长，孵育后将培养物低速离心后弃去部分上清，剩余培养物混匀后涂板。
希望对你有帮助
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35楼2017-02-01 16:22:49
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xrxleisure

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-17 11:50:44
xn8008: 应助指数+1 2016-11-17 11:51:03
换个感受态细胞试试，有可能是转化用的感受态细胞活性太低了
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2楼2016-11-17 08:22:13
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MIDNA

铁虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-17 11:50:51
引用回帖:
2楼: Originally posted by xrxleisure at 2016-11-17 08:22:13
换个感受态细胞试试，有可能是转化用的感受态细胞活性太低了

感受态应该没有问题，别人用的同一个感受态长出了好多菌落！
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默默搜寻
3楼2016-11-17 08:29:30
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上官凤舞

新虫 (正式写手)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-17 11:50:58
质粒浓度太低？转化时间过短？抗生素浓度过高？

发自小木虫Android客户端
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4楼2016-11-17 08:47:51
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