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Yuanfang_818

金虫 (小有名气)

[求助] 连接转化已有3人参与

道友们,请教一个问题,做质粒的重组实验,先将目的片段连入T载体,之后挑选序列正确的菌,提取质粒后,双酶切,得到三条长带(1200,2200,2800)(因为T载体上有相同的酶切位点),其中2200是目的片段,1200和2800为T载体上的。电泳切胶后,切得2200bp片段胶回收,然后连接入表达载体中,转化后,挑选阳性菌跑PCR。结果绝大多数条带是1200,还有2800的,测序是T载体上的,而我的目的条带却很少有?求教为什么啊,重复过多次了!!!

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小冀-

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【答案】应助回帖

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Yuanfang_818: 金币+3, 有帮助 2016-11-25 10:08:12
是连接的问题吧,要不然就是回收的时候出现了问题

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5楼2016-11-15 11:46:35
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