24小时热门版块排行榜    

查看: 1715  |  回复: 11
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xingwei9830

新虫 (初入文坛)

[交流] SDS-PAGE凝胶凝固不好啦

我按照分子克隆的配方配了12%的丙烯酰胺凝胶(略有改动:分离胶加了4%的甘油,据说可以减少电内渗),但是浓缩胶和分离胶均凝固不好。尤其是浓缩胶凝固效果更差。然后,我重新配了所有的试剂,也换了新的TEMED,任然凝固不好。放在37度培养箱中也是如此。可是我以前配15%的胶时,凝固效果很好。不知道现在问题出在哪儿,好郁闷啊!请求各位大侠给予解答。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xingwei9830

新虫 (初入文坛)

谢谢啦!问题已解决。是AP的问题
7楼2009-03-18 14:34:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

030070316

金虫 (小有名气)

凝固跟过硫酸铵(APS)有关吧,在37度放久点看看。
2楼2008-12-02 16:16:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hnanxxl

金虫 (正式写手)

★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论~ 3-18 14:45
丙烯酰胺凝胶的凝固有两种方法:光聚合(采用核黄素)和化学聚合(过硫酸铵),不过为了操作方便,分离胶和浓缩胶均可采用化学聚合。配制凝胶溶液过程中,每加入一种溶液都有快速、充分的混匀,这样才能保证反应充分,才能得到好的凝聚效果。我不知道加入甘油有何用处,我从来没使用过,但分离效果非常好。正如2楼所言,如果用过硫酸铵聚合,最好现用现配(也可先配制成浓度较大的贮存液,这样可存放一定时间),否则直接影响聚合效果。
3楼2008-12-02 22:02:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)

AP最好现配现用吧
你的日子如何,你的力量也必如何!
4楼2008-12-02 22:35:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:40 by 4wMiSEwB6436
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 7lpolszZVXgi 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:08 by 4wMiSEwB6436
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +23 医学老男孩 2026-08-13 49/2450 2026-08-14 20:02 by zhaifei
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 好奇怪的filecode +6 布布和一二 2026-08-08 7/350 2026-08-14 13:38 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
请填处理意见