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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 聚丙烯酰胺凝胶电泳
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艳子92

新虫 (小有名气)
引用回帖:
40楼: Originally posted by chenj-315 at 2016-11-15 23:28:57
0.5
...

那你能告诉我胶是怎么配的么

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41楼2016-11-15 23:30:27
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田生帅菜

新虫 (正式写手)
引用回帖:
32楼: Originally posted by chenj-315 at 2016-11-15 22:54:22
谁告诉你不能用聚丙烯酰胺跑DNA？你师兄师姐没教你么
...

没人教过。请你赐教了！什么时候用page？和琼脂糖有什么区别？

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42楼2016-11-15 23:49:29
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lirujian1994

新虫 (初入文坛)
聚丙烯酰胺凝胶可以检测dna 一般用acr:bis29:1的母液，配置6

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43楼2016-11-16 00:55:16
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lirujian1994

新虫 (初入文坛)
配置6-9％的胶 跑小板的话一般7.5的母液 5的5*tbe 12.5的水配25ml9％的胶，电泳可以1*tbe恒压跑180V，您要是用的17.5％的胶的话感觉浓度太高，胶的孔隙小，不易跑开

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44楼2016-11-16 01:03:41
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egmnmt65

金虫 (初入文坛)
你是要跑多大的蛋白，17.5的胶跑的应该是很小分子的蛋白吧，我们的分离胶一般都是12%的，适合20k-90k左右的蛋白，还有我感觉你的电压有点高，但也不至于跑不出来，高电压一般会造成蛋白带跑弯。开始跑浓缩胶的时候我一般只用80V，分离胶我用120V。

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45楼2016-11-16 05:59:20
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饮湖潇湘

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
24楼: Originally posted by 艳子92 at 2016-11-15 22:15:10
应该是什么缓冲液，我配胶是用40的胶配成17.5的胶，加水，50*TAE,APS和temed
...

跑不动一般都是电流太小，你可以看看胶跑起来时电流大小，胶里的离子浓度与缓冲液一致跑起来才正常。一般DNA检测的话12的胶就够了，话说我们都是自己配的你们用的是商业话的啊，

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46楼2016-11-16 09:30:41
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ztt2015

新虫 (小有名气)
引用回帖:
1楼: Originally posted by 艳子92 at 2016-11-11 10:33:49
为什么我做聚丙烯酰胺凝胶电泳，连marker也跑不下来啊，180v三分钟然后跑135v跑了一个多小时就跑下来一点点，三厘米吧。。而且带是那种笑带，求问为什么，该怎么解决。胶是17.5的胶
biostar2009 ...

胶浓度太高了吧，对着分子量，查一下该用多高浓度的。

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47楼2016-11-16 09:58:14
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艳子92

新虫 (小有名气)
引用回帖:
46楼: Originally posted by 饮湖潇湘 at 2016-11-16 09:30:41
跑不动一般都是电流太小，你可以看看胶跑起来时电流大小，胶里的离子浓度与缓冲液一致跑起来才正常。一般DNA检测的话12的胶就够了，话说我们都是自己配的你们用的是商业话的啊，
...

胶是买的40的胶然后配成17.5

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48楼2016-11-16 11:11:43
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艳子92

新虫 (小有名气)
引用回帖:
47楼: Originally posted by ztt2015 at 2016-11-16 09:58:14
胶浓度太高了吧，对着分子量，查一下该用多高浓度的。
...

现在是marker也跑不下来呢

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49楼2016-11-16 11:12:13
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艳子92

新虫 (小有名气)
引用回帖:
45楼: Originally posted by egmnmt65 at 2016-11-16 05:59:20
你是要跑多大的蛋白，17.5的胶跑的应该是很小分子的蛋白吧，我们的分离胶一般都是12%的，适合20k-90k左右的蛋白，还有我感觉你的电压有点高，但也不至于跑不出来，高电压一般会造成蛋白带跑弯。开始跑浓缩胶的时候我 ...

我是要跑DNA

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50楼2016-11-16 11:13:43
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