应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 镍柱纯化相关求助
51/1返回列表
查看: 1514  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

libin6583802

新虫 (初入文坛)

[交流] 镍柱纯化相关求助 已有7人参与

刚做镍柱纯化，有些不明白，求指导。
请问一下目的蛋白被吸附后，要用咪唑梯度洗脱，可不可以直接用高浓度的咪唑洗脱，不进行梯度啊？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-11-08 16:45:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ylz2433

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by XMC-7 at 2016-11-09 10:56:53
这个也不一定的。情况一：样品较杂，最好梯度洗脱，以获得高纯度的目的蛋白；情况二：样品较纯，需要浓缩时，一步洗脱也可以。其他情况酌情处理，纯化情形复杂多变，多多尝试。

一般不会用镍柱浓缩吧？为什么不用浓缩管？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
努力，加油！
7楼2016-11-09 15:44:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

ylz2433

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kuaile5420: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-08 23:13:34
当然不可以喽，直接用高浓度就会把所有的蛋白全部洗脱下来，那上柱子干嘛呢？
梯度洗脱就是用不同浓度的咪唑分别洗脱下与镍柱有不同亲和力的蛋白，亲和力越小，低浓度的咪唑就能洗脱下来，一般是杂蛋白；亲和力越大，所需咪唑浓度就越高了，一般是带有组氨酸的目的蛋白。
赞一下 回复此楼
努力，加油！
2楼2016-11-08 17:05:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

XMC-7

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这个也不一定的。情况一：样品较杂，最好梯度洗脱，以获得高纯度的目的蛋白；情况二：样品较纯，需要浓缩时，一步洗脱也可以。其他情况酌情处理，纯化情形复杂多变，多多尝试。
赞一下 回复此楼
能帮的帮，难事求助的心情咱也经历过
3楼2016-11-09 10:56:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

libin6583802

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ylz2433 at 2016-11-08 17:05:23
当然不可以喽，直接用高浓度就会把所有的蛋白全部洗脱下来，那上柱子干嘛呢？
梯度洗脱就是用不同浓度的咪唑分别洗脱下与镍柱有不同亲和力的蛋白，亲和力越小，低浓度的咪唑就能洗脱下来，一般是杂蛋白；亲和力越大 ...

还有一点想问一下，分泌型蛋白可以直接用发酵液过柱子吗？还是需要怎么处理一下？
赞一下 回复此楼
4楼2016-11-09 13:36:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 284求调剂 +8 天下熯 2026-02-28 8/400 2026-03-02 00:15 by 暮雨星晴
[考研] 材料学硕318求调剂 +11 February_Feb 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:53 by ccp273206157
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分，求调剂 +5 wsl111 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:45 by 暮雨星晴
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +3 Qwertyuop 2026-03-01 3/150 2026-03-01 23:18 by aaadim
[考研] 0854复试调剂 276 +3 wmm9 2026-03-01 3/150 2026-03-01 23:13 by 热情沙漠
[基金申请] 成果系统访问量大，请一小时后再尝试。---NSFC啥时候好哦，已经两天这样了 +4 NSFC2026我来了 2026-02-28 4/200 2026-03-01 22:37 by 铁门栓
[考研] 材料类求调剂 +10 wana_kiko 2026-02-28 12/600 2026-03-01 22:10 by 海嵙Y
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 12/600 2026-03-01 19:48 by 好好好1233
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 272求调剂 +6 材紫有化 2026-02-28 6/300 2026-03-01 18:58 by 18137688336
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +5 弗格个 2026-02-28 8/400 2026-03-01 17:25 by sunny81
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂； 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭