应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 镍柱纯化相关求助
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
52/1返回列表
查看: 1540  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

libin6583802

新虫 (初入文坛)

[交流] 镍柱纯化相关求助 已有7人参与

刚做镍柱纯化，有些不明白，求指导。
请问一下目的蛋白被吸附后，要用咪唑梯度洗脱，可不可以直接用高浓度的咪唑洗脱，不进行梯度啊？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-11-08 16:45:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
当然可以，只是纯化的纯度可能会受影响，因为镍柱不只吸附目标蛋白，也吸附杂志，拉梯度是为了纯度更高

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2016-11-10 14:08:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

ylz2433

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kuaile5420: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-08 23:13:34
当然不可以喽，直接用高浓度就会把所有的蛋白全部洗脱下来，那上柱子干嘛呢？
梯度洗脱就是用不同浓度的咪唑分别洗脱下与镍柱有不同亲和力的蛋白，亲和力越小，低浓度的咪唑就能洗脱下来，一般是杂蛋白；亲和力越大，所需咪唑浓度就越高了，一般是带有组氨酸的目的蛋白。
赞一下 回复此楼
努力，加油！
2楼2016-11-08 17:05:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

XMC-7

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这个也不一定的。情况一：样品较杂，最好梯度洗脱，以获得高纯度的目的蛋白；情况二：样品较纯，需要浓缩时，一步洗脱也可以。其他情况酌情处理，纯化情形复杂多变，多多尝试。
赞一下 回复此楼
能帮的帮，难事求助的心情咱也经历过
3楼2016-11-09 10:56:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

libin6583802

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ylz2433 at 2016-11-08 17:05:23
当然不可以喽，直接用高浓度就会把所有的蛋白全部洗脱下来，那上柱子干嘛呢？
梯度洗脱就是用不同浓度的咪唑分别洗脱下与镍柱有不同亲和力的蛋白，亲和力越小，低浓度的咪唑就能洗脱下来，一般是杂蛋白；亲和力越大 ...

还有一点想问一下，分泌型蛋白可以直接用发酵液过柱子吗？还是需要怎么处理一下？
赞一下 回复此楼
4楼2016-11-09 13:36:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +4 niko- 2026-03-27 4/200 2026-03-28 07:26 by fungyao
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学材料与化工方向336分 +6 辰沐5211314 2026-03-26 6/300 2026-03-28 03:31 by fmesaito
[考研] 0703化学求调剂，各位老师看看我！！！ +5 祁祺祺 2026-03-25 5/250 2026-03-27 21:44 by 东方猪猪
[考研] 299求调剂 +6 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 6/300 2026-03-27 12:43 by 果果妈咪
[考研] 316求调剂 +5 Pigcasso 2026-03-24 5/250 2026-03-27 12:10 by zhshch
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
[考研] 一志愿211，335分，0856，求调剂院校和导师 +4 倾____萧 2026-03-27 5/250 2026-03-27 11:52 by zhshch
[考研] 359求调剂 +4 王了个楠 2026-03-25 4/200 2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[考研] 材料学硕，求调剂 6+5 糖葫芦888ll 2026-03-22 10/500 2026-03-27 08:18 by hypershenger
[考研] 材料调剂 +8 匹克i 2026-03-23 8/400 2026-03-27 08:11 by hypershenger
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:04 by chemisry
[考研] 一志愿武汉理工，总分321，英一数二，求老师收留。 +5 nnnnnnn5 2026-03-25 5/250 2026-03-27 04:42 by wxiongid
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
[考研] 085602 289分求调剂 +8 WWW西西弗斯 2026-03-24 8/400 2026-03-26 16:33 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工（085600）296求调剂 +9 稻妻小编 2026-03-26 9/450 2026-03-26 16:16 by 不吃魚的貓
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭