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木兰8078

禁虫 (正式写手)

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wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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引用回帖:
3楼: Originally posted by 木兰8078 at 2016-11-07 18:28:10
谢谢!那现在我转化得到的都是原来的质粒,没有目标片段的,怎么解释?...

没连上很正常啊,这有好多因素,目的片段大小,浓度,感受态效率等等,尤其是感受态,买的感受态效率比较低,最好用自己做的
6楼2016-11-08 14:23:04
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迷路人啊

新虫 (小有名气)

亲测   两个酶切位点挨着也能连上

发自小木虫IOS客户端
9楼2016-11-08 15:29:02
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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建议分步酶切,酶切后纯化一下再切切完胶回收。估计你原来的酶切不好。如果不确定酶好不好用,分2管做,2个酶不同顺序切,切完第一次电泳看看再切第二次。
为什么
10楼2016-11-08 20:26:13
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zhongmianhua

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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木兰8078: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2016-11-10 11:00:10
你可以分两步进行酶切,但是一定要注意几点:1.酶切质粒的总量不能够太多,否则酶切不完全是很正常的事情   2.酶切的时候需要多酶切多管,方便提高回收片段的浓度   3.酶切片段电泳的时候可以在凝胶上加上这个质粒,方便判断酶切完全是否
体会生活
11楼2016-11-10 08:43:07
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普通回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

你想多了,没这回事,两个酶切位点挨着也能切开

发自小木虫Android客户端
2楼2016-11-07 16:20:03
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木兰8078

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

3楼2016-11-07 18:28:10
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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内容已删除
4楼2016-11-07 18:51:42
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

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可能有的质粒没切开~转化的时候环状质粒进去了,还有就是没连上
···
5楼2016-11-08 10:32:43
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plu3263

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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一个酶切完了 回收 再用另外一个切
7楼2016-11-08 14:42:59
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13781258551

新虫 (初入文坛)

8楼2016-11-08 15:19:14
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