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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 求助大神们 western条带非特异性
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洛洛洛洛柠檬

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助大神们 western条带非特异性 已有1人参与

我做western时 一抗的阴性对照总能出现条带，而且泳道中主要的蛋白条带都能砸出来，实验组也是这样，我的目的条带反而没有或者不明显。这是抗体特异性不好的问题吗？还是封闭的不好， 还是有什么其他可能的原因啊
有什么方法可以解决吗 困扰了很久了
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1楼 2016-11-04 17:33:24
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田生帅菜

新虫 (正式写手)
你的一抗是买的还是自己做的？

发自小木虫IOS客户端
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2楼2016-11-05 22:36:34
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liyu6655

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-08 07:14:33
洛洛洛洛柠檬: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-11-10 13:21:55
本帖内容被屏蔽
3楼2016-11-06 14:16:26
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洛洛洛洛柠檬

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 田生帅菜 at 2016-11-05 22:36:34
你的一抗是买的还是自己做的？

买的 不过一抗放-80冻了至少两年了。拿出来做了差不多一年了。
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4楼2016-11-06 19:24:10
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洛洛洛洛柠檬

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liyu6655 at 2016-11-06 14:16:26
应该是抗体特异性不行，但是具体是一抗不好还是二抗不好，建议做个试验看看。 关于封闭问题应该不会，如果封闭不好的话，不会是条带，而是背景深

二抗是实验室公用的 应该是没有问题的 如果想要验证一抗 做什么实验可以验证出来？谢谢回答
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5楼2016-11-06 19:25:59
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田生帅菜

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 洛洛洛洛柠檬 at 2016-11-06 19:24:10
买的 不过一抗放-80冻了至少两年了。拿出来做了差不多一年了。...

赶紧买新的吧，时间比钱重要，老师要是不给买再说

发自小木虫IOS客户端
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6楼2016-11-06 20:02:42
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洛洛洛洛柠檬

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 田生帅菜 at 2016-11-06 20:02:42
赶紧买新的吧，时间比钱重要，老师要是不给买再说
...

好的 谢谢你
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7楼2016-11-07 11:27:19
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liyu6655

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
8楼2016-11-07 19:52:25
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pangadmire

铁虫 (小有名气)
如何照page胶?

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9楼2016-11-08 01:22:25
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洛洛洛洛柠檬

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by liyu6655 at 2016-11-07 19:52:25
二抗是公用的，别人没有非特异条带的话就应该是一抗的问题

有没有可能是一抗浓度过高所致呢？
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10楼2016-11-08 09:04:31
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