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能养鱼的猫

新虫 (小有名气)

[交流] 关于溶菌酶裂解阳性菌细胞壁

最近做实验筛了一株革兰氏阳性菌,因为要提取的酶是胞内酶,所以想用溶菌酶处理一下细胞壁,但是效果不太好,有哪位大神可以给出具体操作步骤吗?跪谢!!!

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charon1982

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
(1)菌体量加大,多加溶菌酶,甚至可以直接加粉末
(2)液氮研磨
帮助虫友,提升自己
7楼2016-11-07 12:39:12
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普通回帖

深水静流

木虫 (正式写手)

慧景阁


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你用的什么酶?裂解的是细菌还在真菌
你证我证,心证意证
2楼2016-11-04 13:58:24
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能养鱼的猫

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 深水静流 at 2016-11-04 13:58:24
你用的什么酶?裂解的是细菌还在真菌

革兰氏阳性细菌,想用溶菌酶先破壁

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3楼2016-11-05 10:12:03
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jingg1990

金虫 (小有名气)

4楼2016-11-05 17:33:38
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深水静流

木虫 (正式写手)

慧景阁

引用回帖:
3楼: Originally posted by 能养鱼的猫 at 2016-11-05 03:12:03
革兰氏阳性细菌,想用溶菌酶先破壁
...

蜗牛酶  便宜实惠

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你证我证,心证意证
5楼2016-11-06 11:40:14
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stone_f

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 深水静流 at 2016-11-06 11:40:14
蜗牛酶  便宜实惠
...

蜗牛消化酶不是破真菌细胞壁的?
6楼2016-11-06 21:30:14
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向阳风筝

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
您好,溶菌酶需要用预先配制的缓冲液溶解,小量分装,并于-20度保存,使用时浓度一般20mg/L就行,也可以加大使用浓度,使用时应在36度水浴中反应20min或以上,期间适宜翻转混匀。此外除了加溶菌酶还可以用破胞仪(建议首先考虑使用破胞仪,因为可以保证低温操作,以免你的酶释放后高温失活了)!
活好当下,开心就好!
8楼2016-11-10 16:07:23
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lindench

专家顾问 (文坛精英)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 深水静流 at 2016-11-06 11:40:14
蜗牛酶  便宜实惠
...

蜗牛酶可用来破壁阴性菌吗,比如大肠杆菌?效率如何?

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9楼2016-11-10 16:35:21
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上官凤舞

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
适量菌液加上溶菌酶,37度水浴至少一小时吧

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10楼2016-11-11 01:00:40
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