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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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iiitsmegigi

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助求助求助!!!想从芒果cDNA文库中分离出“果胶甲酯酶抑制剂基因”! 已有1人参与

现在发现芒果中有果胶甲酯酶的活性,导师让我从分子生物学角度分离出这段基因,再进行体外表达,研究性质,请问应该用什么技术做啊?
诚心请教各位大牛!

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mayunhui

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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★ ★
感谢参与,应助指数 +1
iiitsmegigi(sytucom代发): 金币+2, 感谢应助,请继续关注楼主回复 2017-01-31 23:28:24
构建表达cDNA文库,再用功能筛选。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

书到用时方恨少
2楼2016-11-03 11:47:14
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iiitsmegigi

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by mayunhui at 2016-11-03 11:47:14
构建表达cDNA文库,再用功能筛选。

能请教一下如何进行功能筛选吗?

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3楼2016-11-10 10:52:20
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mayunhui

新虫 (正式写手)

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3楼: Originally posted by iiitsmegigi at 2016-11-10 10:52:20
能请教一下如何进行功能筛选吗?
...

表达文库基因可以表达,那么含有果胶甲酯酶抑制剂基因的克隆就会表达这个这个蛋白,在根据这个蛋白所作用的产物设计相应实验进行筛选就好。教科书中常见的蓝白斑筛选就属于功能筛选。
书到用时方恨少
4楼2016-11-14 10:42:53
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iiitsmegigi

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by mayunhui at 2016-11-14 10:42:53
表达文库基因可以表达,那么含有果胶甲酯酶抑制剂基因的克隆就会表达这个这个蛋白,在根据这个蛋白所作用的产物设计相应实验进行筛选就好。教科书中常见的蓝白斑筛选就属于功能筛选。...

然后分离纯化出蛋白以后,再分析得到蛋白质氨基酸序列,然后再对应出基因序列吗?

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5楼2016-11-16 10:04:15
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mayunhui

新虫 (正式写手)

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引用回帖:
5楼: Originally posted by iiitsmegigi at 2016-11-16 10:04:15
然后分离纯化出蛋白以后,再分析得到蛋白质氨基酸序列,然后再对应出基因序列吗?
...

不用分离蛋白啊,筛选到阳性克隆后,直接测序就好了。
书到用时方恨少
6楼2016-11-16 10:27:18
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