| 查看: 1746 | 回复: 2 | |||
[交流]
重叠延伸PCR 已有2人参与
|
|
重叠延伸PCR技术（gene splicing by overlap extension PCR，简称SOE PCR）由于采用具有互补末端的引物，使PCR产物形成了重叠链，从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸，将不同来源的扩增片段重叠拼接起来。 实验方法原理 此技术利用PCR技术能够在体外进行有效的基因重组，而且不需要内切酶消化和连接酶处理，可利用这一技术很快获得其它依靠限制性内切酶消化的方法难以得到的产物。重叠延伸PCR技术成功的关键是重叠互补引物的设计。重叠延伸PCR在基因的定点突变、融合基因的构建、长片段基因的合成、基因敲除以及目的基因的扩增等方面有其广泛而独特的应用。 实验材料 基因样品 仪器、耗材 PCR仪 实验步骤 1. 以引物a/b进行pcr1。 2. 以引物c/d进行pcr2。 3. 引物b/c中引入了需要的限制性位点。 4. 混合二者pcr产物，混合以前最好回收一下。 5. 进行pcr延伸反应，只有右面这个可以延伸。 6. 以延伸反应的产物为模板，以a/d为引物进行pcr。 7. 产物即为所需最终产物。 |
回复此楼» 猜你喜欢
课题组招2027级博士 上海工程技术大学 激光智能制造方向
已经有4人回复
-
现代”学阀”该如何界定
已经有8人回复
-
上海工程技术大学 激光智能制造课题组 2027级博士研究生招生
已经有3人回复
-
实名举报：华南理工大学物理与光电学院副院长李志远婚内两次出轨女学生（博士）
已经有16人回复
-
上海工程技术大学激光智能制造课题组｜2027级博士研究生招生公告
已经有11人回复
-
上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生
已经有10人回复
-
申博发邮件
已经有11人回复
-
各位大神，目前国内有哪些比较好用的逆合成软件？
已经有12人回复
-
我的奶奶
已经有3人回复
-
国社科系统bug了，是不是要放榜了？
已经有9人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
2楼2016-11-01 18:50:37
3楼2016-11-28 10:37:19