| 查看: 1644 | 回复: 2 | |||
[交流]
重叠延伸PCR 已有2人参与
|
|
重叠延伸PCR技术（gene splicing by overlap extension PCR，简称SOE PCR）由于采用具有互补末端的引物，使PCR产物形成了重叠链，从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸，将不同来源的扩增片段重叠拼接起来。 实验方法原理 此技术利用PCR技术能够在体外进行有效的基因重组，而且不需要内切酶消化和连接酶处理，可利用这一技术很快获得其它依靠限制性内切酶消化的方法难以得到的产物。重叠延伸PCR技术成功的关键是重叠互补引物的设计。重叠延伸PCR在基因的定点突变、融合基因的构建、长片段基因的合成、基因敲除以及目的基因的扩增等方面有其广泛而独特的应用。 实验材料 基因样品 仪器、耗材 PCR仪 实验步骤 1. 以引物a/b进行pcr1。 2. 以引物c/d进行pcr2。 3. 引物b/c中引入了需要的限制性位点。 4. 混合二者pcr产物，混合以前最好回收一下。 5. 进行pcr延伸反应，只有右面这个可以延伸。 6. 以延伸反应的产物为模板，以a/d为引物进行pcr。 7. 产物即为所需最终产物。 |
回复此楼» 猜你喜欢
一志愿华中农业071010，320求调剂
已经有10人回复
-
材料工程281还有调剂机会吗
已经有43人回复
-
291求调剂
已经有5人回复
-
085801电气专硕272求调剂
已经有18人回复
-
296求调剂
已经有11人回复
-
求调剂学校
已经有14人回复
-
药学求调剂
已经有9人回复
-
复试调剂
已经有22人回复
-
求调剂推荐
已经有5人回复
-
山东省基金2026
已经有10人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
2楼2016-11-01 18:50:37
3楼2016-11-28 10:37:19
