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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 植物RNA的提取
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syjs

[交流] 植物RNA的提取

本人使用美国OMEGA公司的plant RNA Kit 试剂盒提取，在难提取组织操作方案中，采用预沉淀的方法取出多糖多酚类物质。在使用异丙醇沉淀RNA时，离心管里可以看到明显的白色沉淀物，但是操作完成后，电泳检测，只看到很淡的28s、18s条带，基本可以忽略，而有一条很明显的DNA条带，很亮。我用的时花芽，叶片两种都出现了这种情况，请教各位虫子应该怎样改进。
另外，使用美国INtrovigen的试剂盒也用类似问题。

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-2 at 15:14 ]
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1楼 2008-11-29 17:24:43
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十比

木虫 (著名写手)
你电泳跑得太久了吧，另外，omega的我用过，虽不是很好，但还行，可能是因为你的材料的问题吧，试试QIAGEN的kit吧，听说不错，但我没用过。
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2楼2008-11-29 20:51:43
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
QIAGEN的核酸纯化是做得最好的
注意操作的时候避免RNase的污染
所有耗材都要去RNase的，同时速度要快
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3楼2008-11-29 21:11:26
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1423321987

铁虫 (初入文坛)
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4楼2008-11-30 23:54:02
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jasco

木虫 (正式写手)
如果是花芽和叶片，就用trizol就行了，
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5楼2008-12-01 17:49:17
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yeoman

金虫 (正式写手)
不要用试剂盒了，换方法吧，CTAB好一些
今年就有新的文献，让师弟师妹试过，效果还不错（我们的材料绝对比你难得多）
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6楼2008-12-07 16:27:10
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figo.339

木虫 (著名写手)
你跑电泳时间是不是有点长 啊
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7楼2008-12-07 21:33:24
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十比

木虫 (著名写手)
电泳时间有点久了，但可能你的材料就是难提
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8楼2008-12-08 12:16:53
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zhaoyue_82

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yeoman at 2008-12-7 16:27:
不要用试剂盒了，换方法吧，CTAB好一些
今年就有新的文献，让师弟师妹试过，效果还不错（我们的材料绝对比你难得多）

请问 你们的是什么材料啊？我做的是一种药用植物，用TRIZOL法提了好多次，降解得都很严重，请问如果换CTAB法的话会有好的效果吗？
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9楼2009-03-16 16:14:23
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x8q4h11

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhaoyue_82 at 2009-3-16 16:14:

请问 你们的是什么材料啊？我做的是一种药用植物，用TRIZOL法提了好多次，降解得都很严重，请问如果换CTAB法的话会有好的效果吗？

请问你的电泳方法？谢谢
我用的甲醛变性电泳，结果胶的一半亮一半暗（用的goldview染液），可能是背景色盖住了了，观察不到条带……
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10楼2009-03-16 18:44:33
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