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syjs

[交流] 植物RNA的提取

本人使用美国OMEGA公司的plant RNA Kit 试剂盒提取,在难提取组织操作方案中,采用预沉淀的方法取出多糖多酚类物质。在使用异丙醇沉淀RNA时,离心管里可以看到明显的白色沉淀物,但是操作完成后,电泳检测,只看到很淡的28s、18s条带,基本可以忽略,而有一条很明显的DNA条带,很亮。我用的时花芽,叶片两种都出现了这种情况,请教各位虫子应该怎样改进。
另外,使用美国INtrovigen的试剂盒也用类似问题。

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-2 at 15:14 ]
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x8q4h11

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhaoyue_82 at 2009-3-16 16:14:

请问 你们的是什么材料啊?我做的是一种药用植物,用TRIZOL法提了好多次,降解得都很严重,请问如果换CTAB法的话会有好的效果吗?

请问你的电泳方法?谢谢
我用的甲醛变性电泳,结果胶的一半亮一半暗(用的goldview染液),可能是背景色盖住了了,观察不到条带……
10楼2009-03-16 18:44:33
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十比

木虫 (著名写手)

你电泳跑得太久了吧,另外,omega的我用过,虽不是很好,但还行,可能是因为你的材料的问题吧,试试QIAGEN的kit吧,听说不错,但我没用过。
2楼2008-11-29 20:51:43
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

QIAGEN的核酸纯化是做得最好的
注意操作的时候避免RNase的污染
所有耗材都要去RNase的,同时速度要快
3楼2008-11-29 21:11:26
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jasco

木虫 (正式写手)

如果是花芽和叶片,就用trizol就行了,
5楼2008-12-01 17:49:17
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