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求植物激素测定方法GC-MS方法 已有1人参与
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如题，想测定玉米雌穗中IAA、CK、ABA、GA含量，求样品前处理及测定方法步骤。 发自小木虫IOS客户端 |
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准确称取1 g样品，6 mL的80 %含有1 %冰乙酸的预冷甲醇混合，将组织混合液转移至离心管中置于4 ℃，避光的环境中抽提15 h，制成粗提液。同时，将用6 mL甲醇与6 mL 的水过C18小柱，用于活化小柱。 将粗提液放入离心机中，4 ℃，10000 rpm离心10 min，吸取0.5 mL上清液与3.5 mL 1%冰乙酸混合，振荡后放入C18小柱中，待混合液全部通过C18小柱后，弃去流出液，过柱完成后，再向C18小柱中加入4 mL 10 %的甲醇用于清洗杂质，待加入液全部通过C18小柱后，再次弃去流出液，然后再向C18小柱中加入1 mL，80 %的甲醇洗脱被C18小柱收附的植物内源激素，收集的洗脱液，将洗脱液0.45 μm滤膜后转入一支干净离心管中，待上样检测。 色谱条件：流动相为甲醇与冰醋酸水溶液混合物，3种溶液比例为：甲醇∶0.075%冰醋酸=45∶55（v/v）。流动相的流速设为0.8 mL·min-1，柱温是30 ℃，检测器的波长设为254 nm，进样量为10 μL。 |
2楼2016-12-04 21:08:14