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假人人

新虫 (小有名气)

[交流] 求植物激素测定方法GC-MS方法 已有1人参与

如题,想测定玉米雌穗中IAA、CK、ABA、GA含量,求样品前处理及测定方法步骤。

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新虫 (初入文坛)


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准确称取1 g样品,6 mL的80 %含有1 %冰乙酸的预冷甲醇混合,将组织混合液转移至离心管中置于4 ℃,避光的环境中抽提15 h,制成粗提液。同时,将用6 mL甲醇与6 mL 的水过C18小柱,用于活化小柱。
将粗提液放入离心机中,4 ℃,10000 rpm离心10 min,吸取0.5 mL上清液与3.5 mL 1%冰乙酸混合,振荡后放入C18小柱中,待混合液全部通过C18小柱后,弃去流出液,过柱完成后,再向C18小柱中加入4 mL 10 %的甲醇用于清洗杂质,待加入液全部通过C18小柱后,再次弃去流出液,然后再向C18小柱中加入1 mL,80 %的甲醇洗脱被C18小柱收附的植物内源激素,收集的洗脱液,将洗脱液0.45 μm滤膜后转入一支干净离心管中,待上样检测。
色谱条件:流动相为甲醇与冰醋酸水溶液混合物,3种溶液比例为:甲醇∶0.075%冰醋酸=45∶55(v/v)。流动相的流速设为0.8 mL·min-1,柱温是30 ℃,检测器的波长设为254 nm,进样量为10 μL。
2楼2016-12-04 21:08:14
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