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BAC重组质粒构建问题,电转后不长。
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| 各位大神,我现在在构建BAC基因文库,质粒(8000bp)连接目标片段(20-40kb),利用T4连接酶将其在16℃连接20h,利用异丙醇和70%的乙醇洗涤两次后除盐,室温下干燥,利用20ul H2O溶解,通过电转导入到EPI300中,但是现在的问题为没有克隆子长出。请问各位大神有什么好的建议和解决方法。谢谢! |
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