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请教如何将还原抗体F(ab')2为F（ab'） 已有1人参与
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| 我最近一直在对抗体进行酶切，使用胃蛋白酶进行酶切，现在已经可以将抗体的Fc段切除，但是在对F（ab'）2进行还原时一直无法完成。我具体是这样操作的：取0.2mg的抗体加入一定的胃蛋白酶，pH 2.6，37摄氏度培养1小时，HPLC检测酶切效果，图谱显示酶切完全。将反应液pH调节到8.0终止酶切反应，再加入终浓度为50mM的2-巯基乙胺和终浓度为10mM的EDTA，37摄氏度反应90分钟，HPLC检验图谱，结果发现并没有将二价抗体还原为一价抗体。延长此反应时间并没有很好地效果，我又使用了DTT对二价抗体进行还原，结果DTT将抗体切成很多小片段。请教大家我应该怎样继续试验，将抗体还原？谢谢大家了，急啊！ |
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2楼2016-10-27 20:27:43