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开心365

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白纯化求助 已有3人参与

液相分离纯化接取的蛋白跑胶不太纯 还可以再用液相纯化吗?要注意哪些问题呢?求大神帮忙

@hc-material 发自小木虫IOS客户端
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小圆脸

新虫 (初入文坛)

你们居然是跑胶 我们居然是跑制备柱的液相
2楼2016-10-27 19:18:46
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开心365

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小圆脸 at 2016-10-27 19:18:46
你们居然是跑胶 我们居然是跑制备柱的液相

你们听着很高大上的样子 我们是接样后冷冻 然后银染和WB 感觉不太纯的样子 蛋白胶仍然有杂带

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3楼2016-10-27 23:04:00
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

问题太笼统,纯度不够,在进行一次或多次液相当然可以。
4楼2016-10-30 17:58:15
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daid01

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你是一开始蛋白就行了液相处理是吗?有没有做过相关凝胶柱层析或者阳离子交换层析或者阴离子交换层析之类的?很多时候蛋白里面的杂志可以用这些方法除掉,效果很好,处理之后在进行液相
5楼2016-10-31 07:59:27
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生物百科助手

新虫 (初入文坛)


可以的,根据出峰时间接样,www.glorybio.cn
6楼2016-10-31 10:12:18
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开心365

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by daid01 at 2016-10-31 07:59:27
你是一开始蛋白就行了液相处理是吗?有没有做过相关凝胶柱层析或者阳离子交换层析或者阴离子交换层析之类的?很多时候蛋白里面的杂志可以用这些方法除掉,效果很好,处理之后在进行液相

我是溶了蛋白后直接进液相了 因为蛋白性质我们实验室基本都是用液相纯化的

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7楼2016-10-31 14:41:42
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开心365

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 生物百科助手 at 2016-10-31 10:12:18
可以的,根据出峰时间接样,www.glorybio.cn

好的,谢谢啦

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8楼2016-10-31 14:41:59
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开心365

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hc-material at 2016-10-30 17:58:15
问题太笼统,纯度不够,在进行一次或多次液相当然可以。

嗯嗯好的,这些专家帮忙

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9楼2016-10-31 14:42:29
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yxncas-2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

可以提前做一些处理之后再上液相。也可以把液相按峰收集富集以后,重新调整洗脱梯度,再纯化也可以的!
10楼2016-10-31 16:21:43
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