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stantontang

金虫 (小有名气)

[求助] 关于多糖DEAE-纤维素柱子分离问题 已有5人参与

看了几篇文献和硕博论文,发现DEAE-纤维素上样都是几时毫克的样,然后分离出来还要浓缩,冷冻干燥。请问这么微小的量最后怎么还能干燥成粉末固体?然后还要上凝胶色谱柱。
是每次几十毫克然后上很多次,最后混在一起?
关于各管苯酚-硫酸法测吸光度,是立即测绘制曲线还是洗固定柱体积,然后最后测绘曲线?
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qingxiayuan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
stantontang(shenyingbin代发): 金币+2, 谢谢参与应助 2016-10-28 20:05:11
看柱子大小,一般2.6x50或者60cm的可以上样几百毫克,确实是合并后再上凝胶柱,最后一句没看明白
2楼2016-10-25 08:32:14
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w911227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
多次收集,最后一句我也不知道你想表达个啥意思
苦难的日子终将逝去,但强者却永存
3楼2016-10-25 08:54:41
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stantontang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by w911227 at 2016-10-25 08:54:41
多次收集,最后一句我也不知道你想表达个啥意思

我意思是如何确定洗脱完成,是边收集边测当无吸光度确定洗脱完成,还是洗固定柱体积然后默认洗脱完全再测吸光度
6楼2016-10-26 18:56:09
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普通回帖

MorsThanatos

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
前一两次上完样,都要苯酚硫酸法测糖含量,绘制曲线,确定好多少到多少管是出峰的,之后上样就不用苯酚硫酸法测了,直接在相应的管接收即可。每次接收的相同部分混合在一起也没有问题,量多了一起冻干方便点,但是之前的要冻起来,不然多糖会坏。
苯酚硫酸法测的时候不用立即测,一次收集完所有管再一起测。
4楼2016-10-25 17:20:32
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stantontang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by MorsThanatos at 2016-10-25 17:20:32
前一两次上完样,都要苯酚硫酸法测糖含量,绘制曲线,确定好多少到多少管是出峰的,之后上样就不用苯酚硫酸法测了,直接在相应的管接收即可。每次接收的相同部分混合在一起也没有问题,量多了一起冻干方便点,但是之 ...

感谢
5楼2016-10-26 18:53:49
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stantontang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by qingxiayuan at 2016-10-25 08:32:14
看柱子大小,一般2.6x50或者60cm的可以上样几百毫克,确实是合并后再上凝胶柱,最后一句没看明白

我意思是如何确定洗脱完成,是边收集边测当无吸光度确定洗脱完成,还是洗固定柱体积然后默认洗脱完全再测吸光度
7楼2016-10-26 18:56:42
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w911227

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by stantontang at 2016-10-26 18:56:09
我意思是如何确定洗脱完成,是边收集边测当无吸光度确定洗脱完成,还是洗固定柱体积然后默认洗脱完全再测吸光度...

边收集边测当无吸光度确定洗脱完成
苦难的日子终将逝去,但强者却永存
8楼2016-10-26 20:32:30
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

柱子越长分离效果越好,上样量越大分离效果会逐渐变差,因为扩散作用,会导致峰变的很宽,拖尾。也就是需要很多管才能收集好。
因为凝胶洗脱比较慢,我们这边的做法是,第一次的时候,设置好流速,接受时间,流动相充足。然后过夜或者一段时间后,再去按个检测,测吸光度。
9楼2016-10-27 20:00:20
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stantontang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by zinfly at 2016-10-27 20:00:20
柱子越长分离效果越好,上样量越大分离效果会逐渐变差,因为扩散作用,会导致峰变的很宽,拖尾。也就是需要很多管才能收集好。
因为凝胶洗脱比较慢,我们这边的做法是,第一次的时候,设置好流速,接受时间,流动相 ...

我们这边凝胶柱只能手动进样
10楼2016-10-28 15:04:06
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