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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 碳水化合物 » 关于多糖DEAE-纤维素柱子分离问题
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stantontang

金虫 (小有名气)

[求助] 关于多糖DEAE-纤维素柱子分离问题 已有5人参与

看了几篇文献和硕博论文，发现DEAE-纤维素上样都是几时毫克的样，然后分离出来还要浓缩，冷冻干燥。请问这么微小的量最后怎么还能干燥成粉末固体？然后还要上凝胶色谱柱。
是每次几十毫克然后上很多次，最后混在一起？
关于各管苯酚-硫酸法测吸光度，是立即测绘制曲线还是洗固定柱体积，然后最后测绘曲线？
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1楼 2016-10-24 19:48:23
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qingxiayuan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
stantontang(shenyingbin代发): 金币+2, 谢谢参与应助 2016-10-28 20:05:11
看柱子大小，一般2.6x50或者60cm的可以上样几百毫克，确实是合并后再上凝胶柱，最后一句没看明白
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2楼2016-10-25 08:32:14
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w911227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
多次收集，最后一句我也不知道你想表达个啥意思
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苦难的日子终将逝去，但强者却永存
3楼2016-10-25 08:54:41
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stantontang

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by w911227 at 2016-10-25 08:54:41
多次收集，最后一句我也不知道你想表达个啥意思

我意思是如何确定洗脱完成，是边收集边测当无吸光度确定洗脱完成，还是洗固定柱体积然后默认洗脱完全再测吸光度
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6楼2016-10-26 18:56:09
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普通回帖

MorsThanatos

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
前一两次上完样，都要苯酚硫酸法测糖含量，绘制曲线，确定好多少到多少管是出峰的，之后上样就不用苯酚硫酸法测了，直接在相应的管接收即可。每次接收的相同部分混合在一起也没有问题，量多了一起冻干方便点，但是之前的要冻起来，不然多糖会坏。
苯酚硫酸法测的时候不用立即测，一次收集完所有管再一起测。
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4楼2016-10-25 17:20:32
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stantontang

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by MorsThanatos at 2016-10-25 17:20:32
前一两次上完样，都要苯酚硫酸法测糖含量，绘制曲线，确定好多少到多少管是出峰的，之后上样就不用苯酚硫酸法测了，直接在相应的管接收即可。每次接收的相同部分混合在一起也没有问题，量多了一起冻干方便点，但是之 ...

感谢
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5楼2016-10-26 18:53:49
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stantontang

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by qingxiayuan at 2016-10-25 08:32:14
看柱子大小，一般2.6x50或者60cm的可以上样几百毫克，确实是合并后再上凝胶柱，最后一句没看明白

我意思是如何确定洗脱完成，是边收集边测当无吸光度确定洗脱完成，还是洗固定柱体积然后默认洗脱完全再测吸光度
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7楼2016-10-26 18:56:42
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w911227

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by stantontang at 2016-10-26 18:56:09
我意思是如何确定洗脱完成，是边收集边测当无吸光度确定洗脱完成，还是洗固定柱体积然后默认洗脱完全再测吸光度...

边收集边测当无吸光度确定洗脱完成
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苦难的日子终将逝去，但强者却永存
8楼2016-10-26 20:32:30
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

柱子越长分离效果越好，上样量越大分离效果会逐渐变差，因为扩散作用，会导致峰变的很宽，拖尾。也就是需要很多管才能收集好。
因为凝胶洗脱比较慢，我们这边的做法是，第一次的时候，设置好流速，接受时间，流动相充足。然后过夜或者一段时间后，再去按个检测，测吸光度。
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9楼2016-10-27 20:00:20
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stantontang

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by zinfly at 2016-10-27 20:00:20
柱子越长分离效果越好，上样量越大分离效果会逐渐变差，因为扩散作用，会导致峰变的很宽，拖尾。也就是需要很多管才能收集好。
因为凝胶洗脱比较慢，我们这边的做法是，第一次的时候，设置好流速，接受时间，流动相 ...

我们这边凝胶柱只能手动进样
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10楼2016-10-28 15:04:06
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