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关于链特异性测序的问题 已有1人参与
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链特异性测序的原理是：首先合成第一条cDNA链；然后合成第二条cDNA链的时候混入dUTP；加入接头后，使用酶处理，降解第一条链，这样文库中就只有一条cDNA链。接下来就是PCR扩增模板，测序等步骤。 问题：文库中剩余一条cDNA链之后，PCR扩增还是通过碱基互补配对的原理，仍然会产生类似于cDNA二链的序列。那么，我们之前的混入dUTP、酶降解等步骤，还有什么意义？测序的时候，是如何只测cDNA一链的？ |
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