24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 516  |  回复: 6
当前主题已经存档。

yxx41

金虫 (小有名气)

[交流] 土壤微生物DNA提取不出来……兄弟姐妹们帮个忙啊!!

我最近在提土壤DNA,准备做些分子生态方面的东西,可是我一直就提不出来DNA(提出来的貌似是硫-白色,略显黄色,16,000g离心后稍微晃动一下就会飘起来,因为我做得是白银的废铜矿的土壤,采样的时候看到很多地方有硫晶体,而且很多……没想到土壤里也那么多啊……)跑电泳的话完全一片空白,加样孔、胶上根本看不到任何的痕迹……
我用的方法是zhou j z的SDS高盐法,蛋白酶K没加,所以改为加extraction buffer和SDS后温育四小时,最后沉淀用的是纯酒精,而不是异丙醇……
如果可能的话是不是要先除去S,或者再加一步除去腐殖酸啊,不知道除腐殖酸的过程有没有可能除去S啊……

[ Last edited by 350784478 on 2009-11-3 at 15:24 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

内事不决问百度,外事不决问Google,横批:wikipedia
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

微笑漩涡

新虫 (著名写手)


350784478(金币+1,VIP+0): 11-3 15:24
有可能这个方法不太适合你的样品
可以试试其它的,比如TENP法,先洗上几次后,再用周集中的方法试试.周的方法具有一定的包容性,能用来提取很多环境中的.
另外不妨多在-20放放试试,一晚上也不妨,虽然最后会有一些SDS析出

[ Last edited by 微笑漩涡 on 2008-11-27 at 15:51 ]
2楼2008-11-27 15:49:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


350784478(金币+1,VIP+0): 11-3 15:24
土壤在提取之前一定要用PBS先洗几次,充分洗掉胞外的可溶盐类
然后再用裂解buffer破细胞,离心去土壤
然后后面的步骤就是酚-氯仿抽提或者其他经典路线了
3楼2008-11-27 17:03:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xujb32

银虫 (知名作家)

您好,我下一步有可能做这方面的工作(土壤中菌落多样性分析),请问有什么资料?我的邮箱xujb321@163.com
江湖笑笑生
4楼2008-11-28 15:26:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxx41

金虫 (小有名气)

感谢沙发和板凳上的兄弟!!

谢谢各位啊,我按各位的建议再改改!希望可以成功啊!
内事不决问百度,外事不决问Google,横批:wikipedia
5楼2008-11-28 15:59:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxx41

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2008-11-27 17:03:
土壤在提取之前一定要用PBS先洗几次,充分洗掉胞外的可溶盐类
然后再用裂解buffer破细胞,离心去土壤
然后后面的步骤就是酚-氯仿抽提或者其他经典路线了

请问一下你用的PBS是那种?是不是NaH2PO4、NaCl、KCl、KHPO4的?还是Na2HPO4+NaHPO4?还是别的种类的啊?我总是很惆怅PBS,种类太多了……
内事不决问百度,外事不决问Google,横批:wikipedia
6楼2008-12-04 11:00:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

都一样,无所谓的
7楼2008-12-04 12:58:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yxx41 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 299求调剂 +6 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 6/300 2026-03-27 12:43 by 果果妈咪
[考研] 311求调剂 +7 lin0039 2026-03-26 7/350 2026-03-27 12:42 by 果果妈咪
[考研] 一志愿华东理工大学081700,初试分数271 +6 kotoko_ik 2026-03-23 7/350 2026-03-27 12:29 by 惠州彭于晏
[考研] 277跪求调剂 +3 1915668 2026-03-27 4/200 2026-03-27 11:39 by zhshch
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +10 77chaselx 2026-03-20 10/500 2026-03-27 11:28 by wangjy2002
[考研] 材料292调剂 +11 橘颂思美人 2026-03-23 11/550 2026-03-27 11:25 by wangjy2002
[考研] 调剂推荐 +5 清酒714 2026-03-26 6/300 2026-03-27 11:12 by 不吃魚的貓
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +6 kongweilin 2026-03-26 8/400 2026-03-27 10:18 by FF_16
[考研] 一志愿郑州大学,080500学硕,总分317分求调剂 +4 举个栗子oi 2026-03-24 5/250 2026-03-26 23:15 by 不吃魚的貓
[考研] 329求调剂 +5 1() 2026-03-22 5/250 2026-03-26 20:40 by fmesaito
[考研] 生物学学硕,一志愿湖南大学,初试成绩338 +4 YYYYYNNNNN 2026-03-26 4/200 2026-03-26 19:00 by macy2011
[考研] 271求调剂 +6 生如夏花… 2026-03-22 6/300 2026-03-26 16:48 by 张凯十八号
[考研] 289材料与化工(085600)B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
信息提示
请填处理意见