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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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欣晴5832

金虫 (小有名气)

[交流] 基因组DNA提取

不知道怎么回事,这几次提DNA时总是大部分降解,以前也没出现过这种情况,药品别人已经试过没有问题,怀疑是植物样的问题,怎么才能在这种情况下尽量使得率高一点?
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lxlxyc

铜虫 (小有名气)

提取什么植物的基因组?放置多长时间了?
2楼2008-11-27 08:19:33
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lifei-fei

金虫 (著名写手)

伊丽莎白

恩,磨样时加液氮;裂解时间不要太长;最后用TE溶解!
做有意义的事就是好好活着!
3楼2008-11-27 08:54:42
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欣晴5832

金虫 (小有名气)

植物样是夏天采的,当时就用硅胶干燥,干后挑出硅胶将植物样置于-80°C冰箱保存。磨样时加液氮是一定的,最后用TE溶解过夜,第二天电泳检测。以前提其他植物时效果都很好,最近不知道为什么总是大部分降解。
4楼2008-11-27 20:32:20
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brassica227

铁虫 (小有名气)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-17 10:15
最好把电泳图给我们看看,你可以试一试其它的新鲜的叶片,看看是否降解
5楼2008-11-27 23:17:58
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欣晴5832

金虫 (小有名气)

电泳的结果是泳道中段很亮,是比较典型的降解现象,我还没有试新鲜材料,一方面是采不到那个种的新鲜样,另一方面即使是近缘的也存在种属差异,主要是现在的季节问题
6楼2008-11-28 13:40:17
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lxlxyc

铜虫 (小有名气)


欣晴5832(金币+1,VIP+0):谢谢!
降解速度因植物而异,我们实验室采的有的材料一个周就可以降解彻底,即使硅胶干燥,但DNA降解对有的实验影响也不大,不知道你提取的DNA做什么用途呢
7楼2008-11-29 13:09:47
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欣晴5832

金虫 (小有名气)

主要是想扩增一段目的基因,这个对模板纯度要求比较高
8楼2008-11-29 13:17:46
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gncaas

金虫 (小有名气)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-17 10:16
用硅胶干燥后,可能干燥的不彻底,最好再用低温冷冻抽干机,在干燥一下,可以不用液氮磨,直接打成干粉提取
9楼2008-11-29 16:02:56
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欣晴5832

金虫 (小有名气)

我们实验室没有低温冷冻抽干机,实在不行只能试一下胶回收了
10楼2008-11-29 21:56:33
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