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欣晴5832

金虫 (小有名气)

[交流] 基因组DNA提取

不知道怎么回事，这几次提DNA时总是大部分降解，以前也没出现过这种情况，药品别人已经试过没有问题，怀疑是植物样的问题，怎么才能在这种情况下尽量使得率高一点？
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1楼 2008-11-26 12:42:54
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lxlxyc

铜虫 (小有名气)
提取什么植物的基因组？放置多长时间了？
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2楼2008-11-27 08:19:33
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lifei-fei

金虫 (著名写手)

伊丽莎白
恩，磨样时加液氮；裂解时间不要太长；最后用TE溶解！
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做有意义的事就是好好活着！
3楼2008-11-27 08:54:42
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欣晴5832

金虫 (小有名气)
植物样是夏天采的，当时就用硅胶干燥，干后挑出硅胶将植物样置于-80°C冰箱保存。磨样时加液氮是一定的，最后用TE溶解过夜，第二天电泳检测。以前提其他植物时效果都很好，最近不知道为什么总是大部分降解。
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4楼2008-11-27 20:32:20
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brassica227

铁虫 (小有名气)
★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-17 10:15
最好把电泳图给我们看看，你可以试一试其它的新鲜的叶片，看看是否降解
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5楼2008-11-27 23:17:58
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欣晴5832

金虫 (小有名气)
电泳的结果是泳道中段很亮，是比较典型的降解现象，我还没有试新鲜材料，一方面是采不到那个种的新鲜样，另一方面即使是近缘的也存在种属差异，主要是现在的季节问题
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6楼2008-11-28 13:40:17
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lxlxyc

铜虫 (小有名气)
★
欣晴5832(金币+1,VIP+0):谢谢！
降解速度因植物而异，我们实验室采的有的材料一个周就可以降解彻底，即使硅胶干燥，但DNA降解对有的实验影响也不大，不知道你提取的DNA做什么用途呢
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7楼2008-11-29 13:09:47
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欣晴5832

金虫 (小有名气)
主要是想扩增一段目的基因，这个对模板纯度要求比较高
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8楼2008-11-29 13:17:46
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gncaas

金虫 (小有名气)
★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-17 10:16
用硅胶干燥后，可能干燥的不彻底，最好再用低温冷冻抽干机，在干燥一下，可以不用液氮磨，直接打成干粉提取
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9楼2008-11-29 16:02:56
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欣晴5832

金虫 (小有名气)
我们实验室没有低温冷冻抽干机，实在不行只能试一下胶回收了
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10楼2008-11-29 21:56:33
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