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丹之布丁

新虫 (小有名气)

[交流] 关于流动相和冲柱子的问题

一直很疑惑流动相多久换一次,柱子需要每天过度到100%有机相吗?比如我用的流动相是0.1%甲酸水-乙腈,我的问题是:
1.水相需要每天更换吗?若不需要,可以用两三天?那第二天需要把水相超声5min吗?
2.柱子需要每天做完后都过度到100%乙腈吗?
3.冲柱子时,流动相变动比例有什么要求吗?
做了几天的液质,发现每天基本有半天时间都在排气泡+冲柱子平衡了-_-||
求有经验的大侠们指点指点(??ω??)

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jixfeng

木虫 (正式写手)


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无需,尽量避免长时间保存在酸性、碱性。盐中即可。你的流动相偏酸,以250mm*4.6mm*5um为例,ACN 冲洗10mL 就可以了短期保存了(1周完全冲洗1次 问题不大)。当然也得评估你样品的其他残留可能。
1、建议,10℃一下2-3天问题还不是很大 主要考虑是微生物滋生
2、保存在较大有机相中(非一定指明为100%)能防止疏水塌陷,对于亲水性的色谱柱 不存在此问题。
3、平稳过渡,防止盐析是基本前提,其次按程序平衡即可
不要寻找借口
3楼2016-10-13 11:31:55
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柳絮虫

新虫 (职业作家)


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1.水相需要每天更换吗?确实不需要,可以用两三天(特别是你连续工作),但是,避光好一点。水的质量也是关键,常用娃哈哈水会看到有沉淀,堵塞过滤器!那第二天需要把水相超声5min吗?不用!超声不如过滤
2.柱子需要每天做完后都过渡到100%乙腈吗?这是个好习惯,希望继续
3.冲柱子时,流动相变动比例有什么要求吗? 没什么要求
做了几天的液质,发现每天基本有半天时间都在排气泡+冲柱子平衡了-_-||这确实工作的一部分,很多人都不了解。
4楼2016-10-13 12:17:18
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丹之布丁

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 柳絮虫 at 2016-10-13 12:17:18
1.水相需要每天更换吗?确实不需要,可以用两三天(特别是你连续工作),但是,避光好一点。水的质量也是关键,常用娃哈哈水会看到有沉淀,堵塞过滤器!那第二天需要把水相超声5min吗?不用!超声不如过滤
2.柱子需 ...

但是我们实验室做液质的流动相一般都不抽滤,因为抽滤过程中可能会引入滤纸上的东西,带入杂质

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6楼2016-10-13 12:38:46
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权劭

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不工作时,连续低速可以的,尽量的不要长时间用缓冲盐

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7楼2016-10-16 11:09:53
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人渣54号

至尊木虫 (著名写手)


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水的话看环境  环境好放几天都没事  有脱气机超声到不打紧  甲酸水的话有啥好过度的  乙腈好了直接流动相就是了

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2楼2016-10-13 11:18:30
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丹之布丁

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jixfeng at 2016-10-13 11:31:55
无需,尽量避免长时间保存在酸性、碱性。盐中即可。你的流动相偏酸,以250mm*4.6mm*5um为例,ACN 冲洗10mL 就可以了短期保存了(1周完全冲洗1次 问题不大)。当然也得评估你样品的其他残留可能。
1、建议,10℃一下 ...

好的,谢谢

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5楼2016-10-13 12:36:39
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风过疏竹

金虫 (小有名气)


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引用回帖:
4楼: Originally posted by 柳絮虫 at 2016-10-13 12:17:18
1.水相需要每天更换吗?确实不需要,可以用两三天(特别是你连续工作),但是,避光好一点。水的质量也是关键,常用娃哈哈水会看到有沉淀,堵塞过滤器!那第二天需要把水相超声5min吗?不用!超声不如过滤
2.柱子需 ...

您好,过滤指的就是真空抽滤么?还想问您,为什么我超声乙腈时一直有气泡?

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8楼2017-11-14 17:31:30
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柳絮虫

新虫 (职业作家)


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引用回帖:
8楼: Originally posted by 风过疏竹 at 2017-11-14 17:31:30
您好,过滤指的就是真空抽滤么?还想问您,为什么我超声乙腈时一直有气泡?
...

过滤,真空过滤,使用滤膜。有些气泡是超声导致的,所以,建议超声脱气5-8分钟左右足够了。
9楼2017-11-15 16:35:31
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lxp930826

新虫 (著名写手)


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水相不用时可以放入冰箱保存,可以保存2周

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10楼2017-11-15 22:28:22
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