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丹之布丁

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[交流] 关于流动相和冲柱子的问题

一直很疑惑流动相多久换一次，柱子需要每天过度到100％有机相吗？比如我用的流动相是0.1％甲酸水-乙腈，我的问题是：
1.水相需要每天更换吗？若不需要，可以用两三天？那第二天需要把水相超声5min吗？
2.柱子需要每天做完后都过度到100％乙腈吗？
3.冲柱子时，流动相变动比例有什么要求吗？
做了几天的液质，发现每天基本有半天时间都在排气泡＋冲柱子平衡了-_-||
求有经验的大侠们指点指点(??ω??)

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1楼 2016-10-13 11:11:24
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jixfeng

管理员

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无需，尽量避免长时间保存在酸性、碱性。盐中即可。你的流动相偏酸，以250mm*4.6mm*5um为例，ACN 冲洗10mL 就可以了短期保存了（1周完全冲洗1次 问题不大）。当然也得评估你样品的其他残留可能。
1、建议，10℃一下2-3天问题还不是很大 主要考虑是微生物滋生
2、保存在较大有机相中（非一定指明为100%）能防止疏水塌陷，对于亲水性的色谱柱 不存在此问题。
3、平稳过渡，防止盐析是基本前提，其次按程序平衡即可
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不要寻找借口
3楼2016-10-13 11:31:55
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柳絮虫

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
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1.水相需要每天更换吗？确实不需要，可以用两三天（特别是你连续工作），但是，避光好一点。水的质量也是关键，常用娃哈哈水会看到有沉淀，堵塞过滤器！那第二天需要把水相超声5min吗？不用！超声不如过滤
2.柱子需要每天做完后都过渡到100％乙腈吗？这是个好习惯，希望继续
3.冲柱子时，流动相变动比例有什么要求吗？ 没什么要求
做了几天的液质，发现每天基本有半天时间都在排气泡＋冲柱子平衡了-_-||这确实工作的一部分，很多人都不了解。
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4楼2016-10-13 12:17:18
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丹之布丁

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
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4楼: Originally posted by 柳絮虫 at 2016-10-13 12:17:18
1.水相需要每天更换吗？确实不需要，可以用两三天（特别是你连续工作），但是，避光好一点。水的质量也是关键，常用娃哈哈水会看到有沉淀，堵塞过滤器！那第二天需要把水相超声5min吗？不用！超声不如过滤
2.柱子需 ...

但是我们实验室做液质的流动相一般都不抽滤，因为抽滤过程中可能会引入滤纸上的东西，带入杂质

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6楼2016-10-13 12:38:46
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权劭

主管区长

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不工作时，连续低速可以的，尽量的不要长时间用缓冲盐

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7楼2016-10-16 11:09:53
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普通回帖

人渣54号

专家顾问

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水的话看环境  环境好放几天都没事  有脱气机超声到不打紧  甲酸水的话有啥好过度的  乙腈好了直接流动相就是了

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2楼2016-10-13 11:18:30
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丹之布丁

专家顾问

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3楼: Originally posted by jixfeng at 2016-10-13 11:31:55
无需，尽量避免长时间保存在酸性、碱性。盐中即可。你的流动相偏酸，以250mm*4.6mm*5um为例，ACN 冲洗10mL 就可以了短期保存了（1周完全冲洗1次 问题不大）。当然也得评估你样品的其他残留可能。
1、建议，10℃一下 ...

好的，谢谢

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5楼2016-10-13 12:36:39
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风过疏竹

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
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4楼: Originally posted by 柳絮虫 at 2016-10-13 12:17:18
1.水相需要每天更换吗？确实不需要，可以用两三天（特别是你连续工作），但是，避光好一点。水的质量也是关键，常用娃哈哈水会看到有沉淀，堵塞过滤器！那第二天需要把水相超声5min吗？不用！超声不如过滤
2.柱子需 ...

您好，过滤指的就是真空抽滤么？还想问您，为什么我超声乙腈时一直有气泡？

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8楼2017-11-14 17:31:30
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柳絮虫

专家顾问

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8楼: Originally posted by 风过疏竹 at 2017-11-14 17:31:30
您好，过滤指的就是真空抽滤么？还想问您，为什么我超声乙腈时一直有气泡？
...

过滤，真空过滤，使用滤膜。有些气泡是超声导致的，所以，建议超声脱气5-8分钟左右足够了。
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9楼2017-11-15 16:35:31
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lxp930826

主管区长

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
水相不用时可以放入冰箱保存，可以保存2周

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10楼2017-11-15 22:28:22
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