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wlw03sk1

银虫 (正式写手)

[交流] HPLC 流速-峰面积变化 请教

做HPLC,流动相为60%甲醇
1>如果流动相的流速从1ml/min改为0.7ml/min,保留时间会发生延迟,
但是峰面积是不是发生变化?
我们的实验中发生了很大的改变
2>流速从1ml/min改为0.7ml/min,为什么峰型发生了变化,特别是最后一个峰


以下两图:1 流速为1ml/min;   2,流速为0.7ml/min

谢谢了
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开心做人,快乐做事weibo.com/wlw03sk1
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wangyuewen

首先,流速变化,峰面积是一定会变化的,而且峰型也有可能发生变化。
从你的色谱图看来,感觉第二个峰没有分开,所以峰型变化较大,第三个峰的变化趋势和第二个峰相似。建议你多平衡一段时间,因为基线不够稳定,峰型不好可以更改柱子试试,改变一下流动相的比例以及进样量,应该会有所改善!
3楼2008-11-26 16:31:25
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chgli1981

铁杆木虫 (著名写手)

流速变化,峰面积是会变化的
至于峰型变化,可能是你的进样量过大,在大流速时分配平衡不好,也有可能是你柱子前头有塌陷
2楼2008-11-26 11:09:07
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zhangxuan200

铁杆木虫 (正式写手)

浓度型检测器的响应值正比于溶质在流动相中的浓度,测量的是流动相中溶质浓度的瞬间变化大,局部液相色谱检测器属这一类检测器。当样品量一定时,检测器瞬间响应,峰高响应值与流动相流速无关;峰面积响应值与流动相流速成反比,峰面积与流速乘积为常数。

质量型检测器的响应值正比于单位时间内通过检测器的物资的质量,峰面积与流动相流速无关,峰高响应值与流速成正比。例如库仑检测器就是质量型检测器

紫外检测器 流速与峰面积成反比,流速与峰面积的乘积是常数
4楼2008-11-28 09:36:41
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