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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » HPLC 流速-峰面积变化 请教
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wlw03sk1

银虫 (正式写手)

[交流] HPLC 流速-峰面积变化 请教

做HPLC,流动相为60%甲醇
1>如果流动相的流速从1ml/min改为0.7ml/min,保留时间会发生延迟,
但是峰面积是不是发生变化?
我们的实验中发生了很大的改变
2>流速从1ml/min改为0.7ml/min，为什么峰型发生了变化，特别是最后一个峰


以下两图：1 流速为1ml/min；   2，流速为0.7ml/min

谢谢了
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1楼 2008-11-26 09:27:10
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chgli1981

铁杆木虫 (著名写手)
流速变化，峰面积是会变化的
至于峰型变化，可能是你的进样量过大，在大流速时分配平衡不好，也有可能是你柱子前头有塌陷
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2楼2008-11-26 11:09:07
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wangyuewen

首先，流速变化，峰面积是一定会变化的，而且峰型也有可能发生变化。
从你的色谱图看来，感觉第二个峰没有分开，所以峰型变化较大，第三个峰的变化趋势和第二个峰相似。建议你多平衡一段时间，因为基线不够稳定，峰型不好可以更改柱子试试，改变一下流动相的比例以及进样量，应该会有所改善！
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3楼2008-11-26 16:31:25
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zhangxuan200

铁杆木虫 (正式写手)
浓度型检测器的响应值正比于溶质在流动相中的浓度，测量的是流动相中溶质浓度的瞬间变化大，局部液相色谱检测器属这一类检测器。当样品量一定时，检测器瞬间响应，峰高响应值与流动相流速无关；峰面积响应值与流动相流速成反比，峰面积与流速乘积为常数。

质量型检测器的响应值正比于单位时间内通过检测器的物资的质量，峰面积与流动相流速无关，峰高响应值与流速成正比。例如库仑检测器就是质量型检测器

紫外检测器 流速与峰面积成反比，流速与峰面积的乘积是常数
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4楼2008-11-28 09:36:41
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