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a15665819523铜虫 (小有名气)
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[求助]
最近包装病毒出现问题，脂质体法 已有1人参与
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各位大神，我最近正在包装病毒，可是每次用293T包装时，加入脂质体以及质粒后，细胞开始出现漂浮，并且好多小黑点，感觉细胞状态不好，没有包装病毒的293T则状态良好，应该不是培养基成分问题，而且这种病毒在收完之后感染其他细胞，其他细胞也会出现类似的状况。 之后我又把质粒过了0.22um的滤器之后包装病毒，情况好一点点，但依然有类似状况，怀疑可能脂质体出现问题，但脂质体过滤后貌似就不能work了，有没有什么好的办法解决脂质体的问题？还有这种现象是支原体感染么？或是其他什么问题。。。 其大神解答。。。  |
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a15665819523
铜虫 (小有名气)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-10-12 17:47:52
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2楼2016-10-12 16:27:00
a15665819523
铜虫 (小有名气)
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3楼2016-10-13 08:42:32
【答案】应助回帖
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容|
你试试降低一下脂质体的用量吧，可能是带有一些毒性。另外DNA的纯度是不是适合转染，你再检查一下。其实只要有细胞活下来就可以接着培养的，刚转染的时候状态不好是正常现象。 对于支原体污染，因为平常觉察不到，可以定期，比如一个月一次，检测一下支原体污染。在此推荐炎熙生物的支原体PCR检测试剂盒，采用通用引物，可检测各种支原体感染，采用的是降落PCR法，只需一步反应，比常规PCR更灵敏，全程仅需2-3个小时即可获得结果。对于已经受到支原体污染的细胞，可以使用炎熙生物的支原体清除剂，双重杀菌机制，不易耐药，还可以杀灭胞内寄生的支原体，避免反复感染，而且使用也很方便，直接添加进培养基即可。www.biothrive.cn |
4楼2016-10-25 23:07:17