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stantontang

金虫 (小有名气)

[求助] 多糖纯化,关于过阴离子柱子,先用纯水再用盐洗时,用什么检测器 已有1人参与

多糖只能用示差检测器,但是示差检测器不能进行梯度洗脱

求打什么告知多糖用阴离子柱子DEAE-cellulose分离时,用什么检测器如何做到梯度洗脱的啊?
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stantontang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 月亮追老虎 at 2016-10-11 22:28:11
苯酚-硫酸法,没必要买检测器。

你意思就是直接用一柱体积水洗洗完再换氯化钠洗,分别收集?
3楼2016-10-12 21:17:56
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月亮追老虎

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
苯酚-硫酸法,没必要买检测器。
2楼2016-10-11 22:28:11
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月亮追老虎

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by stantontang at 2016-10-12 21:17:56
你意思就是直接用一柱体积水洗洗完再换氯化钠洗,分别收集?...

不一定是一个柱体积,边收集边通过苯酚-硫酸法实验在Excell上作图,当峰走到基线平时是变可以改变梯度,如0、0.1、0.2、0.5、0.75、1 M的NaCl洗脱,至每个梯度洗几个柱体积,要看同时做图来判断,不同样品不一样,通常3-5柱体积便可以,如水洗3BV、0.1M NaCl洗5BV、0.2MNaCl洗3BV等。若以前过过其他柱子,这个问题很容易理解。
4楼2016-10-12 23:15:02
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神雕哥

木虫 (正式写手)

可以用紫外检测器,你用阴离子交换柱分离酸性多糖的话,酸性多糖含有羧基,会在210左右有末端吸收,我之前就是这么做的也分离得到了样品,不放心的话可以用苯酚硫酸法验证峰位组分就可以了,至于示差一般是液相纯度

发自小木虫Android客户端
5楼2016-10-13 12:08:08
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