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初遇

金虫 (小有名气)

[求助] NK92细胞慢病毒感染求助已有2人参与

我们最近做用慢病毒感染NK92细胞,感染效率特别低,而且感染后养几天细胞就全部死掉了,求助大神有没有做过的给点经验,非常感谢!

有怀疑是不是细胞的问题,细胞是否状态不好,或者支原体污染等等,有没有有状态好而且确认没有支原体等污染的NK92细胞给我们一支,或者用其他细胞交换也可以,再次感谢!
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王旭昉

银虫 (小有名气)

我们最近也在做慢病毒感染,感染MSC细胞,效率也很低。
我就是我
2楼2016-10-10 20:52:38
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初遇

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 王旭昉 at 2016-10-10 20:52:38
我们最近也在做慢病毒感染,感染MSC细胞,效率也很低。

你们做的是不是病毒的滴度低呀,有可能包装慢病毒的293T细胞状态不好导致得到病毒滴度低,可以尝试调整细胞状态,我们的病毒是浓缩后的,浓度很高
3楼2016-10-11 09:25:42
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王旭昉

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 初遇 at 2016-10-11 09:25:42
你们做的是不是病毒的滴度低呀,有可能包装慢病毒的293T细胞状态不好导致得到病毒滴度低,可以尝试调整细胞状态,我们的病毒是浓缩后的,浓度很高...

你们是怎么浓缩病毒的呢,我们只用0.45的滤膜过滤了一下就直接用了。
我就是我
4楼2016-10-11 09:57:47
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匿名

用户注销 (著名写手)

感谢参与,应助指数 +1
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5楼2016-10-11 13:00:22
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匿名

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6楼2016-10-11 13:01:00
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匿名

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7楼2016-10-11 13:01:55
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肖颖2009

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
要做好感染先保证细胞状态最佳,不然确实很容易死亡~ 另外,如果毒液浓度太大不做稀释直接原液感染细胞也很容易死的。
8楼2016-10-11 13:18:33
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初遇

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 王旭昉 at 2016-10-11 09:57:47
你们是怎么浓缩病毒的呢,我们只用0.45的滤膜过滤了一下就直接用了。...

买的慢病毒浓缩试剂盒浓缩的病毒,病毒上清也可以感染,如果你的病毒滴度够高的话,也可以感染2次到3次,提高阳性率。
9楼2016-10-11 15:09:30
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初遇

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by pf790352975 at 2016-10-11 13:00:22
你是自己包装的慢病毒还是公司给你做的   滴度有多少呢?

自己包装的慢病毒,用10 cm 皿包装病毒最高差不多有10^6多一些吧,具体多少没有测过
10楼2016-10-11 15:11:10
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