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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » NK92细胞慢病毒感染求助
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初遇

金虫 (小有名气)

[求助] NK92细胞慢病毒感染求助 已有2人参与

我们最近做用慢病毒感染NK92细胞，感染效率特别低，而且感染后养几天细胞就全部死掉了，求助大神有没有做过的给点经验，非常感谢！

有怀疑是不是细胞的问题，细胞是否状态不好，或者支原体污染等等，有没有有状态好而且确认没有支原体等污染的NK92细胞给我们一支，或者用其他细胞交换也可以，再次感谢！
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1楼 2016-10-10 16:57:44
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王旭昉

银虫 (小有名气)
我们最近也在做慢病毒感染，感染MSC细胞，效率也很低。
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我就是我
2楼2016-10-10 20:52:38
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初遇

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 王旭昉 at 2016-10-10 20:52:38
我们最近也在做慢病毒感染，感染MSC细胞，效率也很低。

你们做的是不是病毒的滴度低呀，有可能包装慢病毒的293T细胞状态不好导致得到病毒滴度低，可以尝试调整细胞状态，我们的病毒是浓缩后的，浓度很高
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3楼2016-10-11 09:25:42
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王旭昉

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 初遇 at 2016-10-11 09:25:42
你们做的是不是病毒的滴度低呀，有可能包装慢病毒的293T细胞状态不好导致得到病毒滴度低，可以尝试调整细胞状态，我们的病毒是浓缩后的，浓度很高...

你们是怎么浓缩病毒的呢，我们只用0.45的滤膜过滤了一下就直接用了。
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我就是我
4楼2016-10-11 09:57:47
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匿名

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5楼2016-10-11 13:00:22
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匿名

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6楼2016-10-11 13:01:00
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匿名

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7楼2016-10-11 13:01:55
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肖颖2009

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要做好感染先保证细胞状态最佳，不然确实很容易死亡~ 另外，如果毒液浓度太大不做稀释直接原液感染细胞也很容易死的。
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8楼2016-10-11 13:18:33
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初遇

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 王旭昉 at 2016-10-11 09:57:47
你们是怎么浓缩病毒的呢，我们只用0.45的滤膜过滤了一下就直接用了。...

买的慢病毒浓缩试剂盒浓缩的病毒，病毒上清也可以感染，如果你的病毒滴度够高的话，也可以感染2次到3次，提高阳性率。
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9楼2016-10-11 15:09:30
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初遇

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by pf790352975 at 2016-10-11 13:00:22
你是自己包装的慢病毒还是公司给你做的   滴度有多少呢？

自己包装的慢病毒，用10 cm 皿包装病毒最高差不多有10^6多一些吧，具体多少没有测过
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10楼2016-10-11 15:11:10
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