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d532886741

新虫 (初入文坛)

[交流] 琼脂糖电泳

请问这样的胶图效果是怎么样跑出来的呀、我们自己跑出来的胶背景都好脏;另外之前有人跟我说过把染色剂点到样品里面混合loading buffer,我自己做的时候怎么什么都看不到呀?

琼脂糖电泳
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xn8008: 欢迎发帖交流 2016-10-09 08:46:41
xn8008: 2016-10-11 13:32:04
祝福
2楼2016-10-08 21:28:40
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queen3511

铜虫 (小有名气)

★ ★
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-09 08:46:48
xn8008: 应助指数+1 2016-10-09 08:46:53
首先是做胶要做好,琼脂糖要完全溶解混匀,制胶板干净。其次是拍照曝光可调一下。一般都会很漂亮的,除非你样品有问题。买的荧光染料直接混在 loading buffer里是可以的,使用方法看你购买的说明书

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3楼2016-10-09 03:33:57
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?(?^o^?)?兜

新虫 (初入文坛)

★ ★
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-11 13:32:11
背景乱胶没完全溶解,

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4楼2016-10-09 14:53:28
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小筱雨

新虫 (初入文坛)


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xn8008: 欢迎发帖交流 2016-10-11 13:32:16
是不是提取的样品不干净啊?

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5楼2016-10-11 10:09:41
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still2008

至尊木虫 (著名写手)

破碎世界的守护者

★ ★
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-11 13:32:22
xn8008: 应助指数+1 2016-10-11 13:32:28
胶没融好,温度和时间长一些,倒胶的温度不要太低了,倒胶的速度快一些。应该就没事了。

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有时一本正经,有时胡言乱语。
6楼2016-10-11 12:06:14
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匿名

用户注销 (正式写手)


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本帖仅楼主可见
7楼2016-10-12 16:26:01
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chen5805

至尊木虫 (职业作家)

资深木虫


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一般情况下电泳后的胶图都这样

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8楼2016-10-12 16:43:27
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莹霖LC

新虫 (初入文坛)


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跑出来的胶背景都好脏,不关是否把染色剂点到样品里面混合loading buffer。操作过程要注意以下几点:
1.首先保证所提的蛋白是符合要求的,样品处理过程是否严格按照方法步骤,相关试剂尽量精密滴加等。
2.胶的制备方面,制胶的有些试剂是需要负20度保存,避光等等,玻璃板之类的要干净,加完试剂要充分混匀。保证胶的质量。
3.电泳的试剂,电压或电流条件,转膜的操作等等都要注意。‘
4.抗体的孵育过程,洗膜的过程都要严格按照实验方案进行。(一般封闭,洗膜,孵育抗体等都很影响胶的显影背景)

western bloting 实验结果的影响因素很多,一开始严格按照实验操作步骤,耐心重复,会积累好多经验。
9楼2016-10-12 16:46:18
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wallee

新虫 (初入文坛)

10楼2016-10-12 23:43:34
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