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琼脂糖电泳
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请问这样的胶图效果是怎么样跑出来的呀、我们自己跑出来的胶背景都好脏；另外之前有人跟我说过把染色剂点到样品里面混合loading buffer，我自己做的时候怎么什么都看不到呀？ K_$[C}O)4QYCD0L{~(R~VCU.png |
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| 祝福 |
2楼2016-10-08 21:28:40
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首先是做胶要做好，琼脂糖要完全溶解混匀，制胶板干净。其次是拍照曝光可调一下。一般都会很漂亮的，除非你样品有问题。买的荧光染料直接混在 loading buffer里是可以的，使用方法看你购买的说明书 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-10-09 03:33:57
?(?^o^?)?兜
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4楼2016-10-09 14:53:28
5楼2016-10-11 10:09:41
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胶没融好，温度和时间长一些，倒胶的温度不要太低了，倒胶的速度快一些。应该就没事了。 发自小木虫IOS客户端 |
6楼2016-10-11 12:06:14
匿名
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7楼2016-10-12 16:26:01
8楼2016-10-12 16:43:27
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跑出来的胶背景都好脏，不关是否把染色剂点到样品里面混合loading buffer。操作过程要注意以下几点： 1.首先保证所提的蛋白是符合要求的，样品处理过程是否严格按照方法步骤，相关试剂尽量精密滴加等。 2.胶的制备方面，制胶的有些试剂是需要负20度保存，避光等等，玻璃板之类的要干净，加完试剂要充分混匀。保证胶的质量。 3.电泳的试剂，电压或电流条件，转膜的操作等等都要注意。‘ 4.抗体的孵育过程，洗膜的过程都要严格按照实验方案进行。（一般封闭，洗膜，孵育抗体等都很影响胶的显影背景） western bloting 实验结果的影响因素很多，一开始严格按照实验操作步骤，耐心重复，会积累好多经验。 |
9楼2016-10-12 16:46:18
10楼2016-10-12 23:43:34