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zhao_student

新虫 (小有名气)

[交流] 低表达基因PCR 已有5人参与

对于表达量比较低的基因,能用PCR手段来P出条带吗?

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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-07 17:59:19
xn8008: 应助指数+1 2016-10-07 17:59:24
理论上可以,但是PCR影响因素很多,P不出来也可能是引物、体系、模板质量、程序等原因。
2楼2016-10-07 17:54:15
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queen3511

铜虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-08 00:01:27
表达量和基因好不好P,没什么关系吧。只要引物特异性高就可以p出来

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3楼2016-10-07 23:39:34
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(2016)

金虫 (正式写手)

可以的
4楼2016-10-08 13:51:57
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draco1987

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
低丰度模版是随机起始扩增的。
5楼2016-10-08 17:08:04
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luckydog52

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
基因组里有就行啊。你做的反转吗?

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自信源于一次次成功的积累
6楼2016-10-08 20:01:56
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zhao_student

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2016-10-07 17:54:15
理论上可以,但是PCR影响因素很多,P不出来也可能是引物、体系、模板质量、程序等原因。

你说的各种手段都P不出来,所以否定了技术的问题,应该是谁表达量低的原因。表达量高的就是要比表达量低的PCR后的电泳条带亮,你觉得呢?

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7楼2016-10-08 21:11:17
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zhao_student

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by queen3511 at 2016-10-07 23:39:34
表达量和基因好不好P,没什么关系吧。只要引物特异性高就可以p出来

表达量高的就是要比表达量低的PCR后的电泳条带亮,你觉得呢?

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8楼2016-10-08 21:11:58
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zhao_student

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by (2016) at 2016-10-08 13:51:57
可以的

用普通PCR吗?

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9楼2016-10-08 21:12:19
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zhao_student

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by draco1987 at 2016-10-08 17:08:04
低丰度模版是随机起始扩增的。

你说的很有参考价值,但是我没有接触过随机引物扩增,有什么好的文献可以推荐吗?

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10楼2016-10-08 21:14:00
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