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Free深罙

铁虫 (初入文坛)

[求助] WB电泳求助。疑似拖带现象已有1人参与

新用户,也没几个金币,还请大家帮帮忙了。
图片是同一状态,只是背景分别为白板和黑板。
制胶板子1.5mm的,总上样量20微升(1×buffer+样品)跑的是270Kda大蛋白,分离胶8%,浓缩胶5%,90V恒压大概跑了7h,湿转法260mA恒流2h,这些从有目的条带看应该是没问题的。
5%脱脂奶粉封闭2h,一抗生工BBI的,1:500稀释(推荐200~1000),一抗4℃大约16h;二抗2h(1:2000),期间洗脱均是自配的1×TBST.
要是结果条带都跟第一条一样,我就乐呵了。  WB大神来支支招呀,靠着玩意毕业了。

WB电泳求助。疑似拖带现象
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WB电泳求助。疑似拖带现象-1
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胡棒棒.

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第一,电流大了;第二,样本上样前要离心。
                                                          来自一枚生物专业找不到工作的小硕
6楼2016-10-08 12:53:49
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普通回帖

Free深罙

铁虫 (初入文坛)

很捉急呀,重复多次了。这回至少能有个条带样子
2楼2016-10-06 20:17:24
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Free深罙

铁虫 (初入文坛)

3楼2016-10-07 16:36:42
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liudayeye

木虫 (正式写手)

4楼2016-10-08 08:59:38
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liudayeye

木虫 (正式写手)

是不是在上样是加入了沉淀,多离心是否会改善

发自小木虫Android客户端
5楼2016-10-08 09:00:47
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Free深罙

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 胡棒棒. at 2016-10-08 12:53:49
第一,电流大了;第二,样本上样前要离心。
                                                          来自一枚生物专业找不到工作的小硕

转膜应该是没问题的,270的marker是完全转过去了。  样品我是解冻之后手指弹一弹混匀再离心

发自小木虫Android客户端
7楼2016-10-08 16:19:45
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Free深罙

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by liudayeye at 2016-10-08 08:59:38
到你们宿舍了

宿舍???

发自小木虫Android客户端
8楼2016-10-08 16:20:39
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biocherry

铁虫 (正式写手)

9楼2016-10-08 23:21:55
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IamNovia

新虫 (初入文坛)

第一条跑得正常,后面几个样品跟它的区别都有哪些呢?

发自小木虫Android客户端
10楼2016-10-08 23:57:39
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