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qhiv6

新虫 (小有名气)

[交流] 新手,第一次用T4连接酶,求问怎么用的!! 已有13人参与

想问一下体系,还有反应的温度时间,还有加ATP怎么加,加多少,以前用的诺维赞的一次克隆试剂盒连载体连不上,想试一下别的连接酶!先谢过各位大神了!!

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mwang307

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 010308Jing at 2016-10-03 12:20:21
T4连接酶不需要ATP啊

错。需要ATP的,buffer里提供
纵有沧桑真冷暖温柔镜里梦难留
26楼2016-10-08 15:21:50
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普通回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)


xn8008: 欢迎发帖交流 2016-10-04 08:11:03
xn8008: 金币+1, 应助指数+1 2016-10-04 08:11:08
按说明书操作
2楼2016-10-02 12:57:49
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qhiv6

新虫 (小有名气)

xn8008: 欢迎发帖交流 2016-10-04 08:11:15
引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2016-10-02 12:57:49
按说明书操作

说明书没有体系,只有反应时间

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3楼2016-10-03 08:08:02
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010308Jing

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-04 08:11:23
T4连接酶不需要ATP啊

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4楼2016-10-03 12:20:21
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闲来小译

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-04 08:11:29
官网有体系可以看
5楼2016-10-03 23:44:20
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010308Jing

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-10-04 22:38:43
一般T4连接酶好像有两种,一种是噬菌体的,平末端和黏性末端都可以连;一种是细菌的,只能连接粘性末端

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6楼2016-10-04 09:24:04
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hucuiyao

新虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-10-04 22:37:41
建议计算一下浓度比,在转成体积比。我们做多按DNA:T=3:1,摩尔比。

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yichongweiban
7楼2016-10-04 17:21:41
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华理一学渣

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-10-04 22:38:16
连接载体跟DNA片段?我记得16度条件下,过夜就OK了,注意载体和DNA片段的摩尔比,要控制在某个范围,
8楼2016-10-04 19:36:13
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ttszero

新虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-07 09:04:34
xn8008: 应助指数+1 2016-10-07 09:04:43
t4不好用,那个takara的solution1系列

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9楼2016-10-04 19:58:25
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-10-07 09:04:48
10楼2016-10-04 20:17:26
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