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qhiv6

新虫 (小有名气)

引用回帖:
15楼: Originally posted by pf790352975 at 2016-10-06 15:50:21
你连多大的片段呢?   要看你是什么公司的T4酶了,不同公司连接体系和时间会有区别。

目的片段1000,载体5000

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21楼2016-10-07 13:17:16
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qhiv6

新虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by firefly22 at 2016-10-06 12:03:28
诺唯赞一次克隆试剂盒是单片段克隆C112么?这个试剂盒要注意以下几点哦:1.载体及目的片段的大小分别是50bp-10kb,引物设计很重要,2.两者的配比 最后就是感受态了。祝好运哦
...

引物设计没问题,不知道哪一步出错了,就是连不上,产品里带的阳性对照组长的比较好,说明酶和感受态都是没有问题的,然而自己提纯的载体和目的片段就出了问题,提出来的浓度不高,有时候平板里一个菌都不会长,不知道是什么原因!

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22楼2016-10-07 13:20:15
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qhiv6

新虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by firefly22 at 2016-10-06 12:03:28
诺唯赞一次克隆试剂盒是单片段克隆C112么?这个试剂盒要注意以下几点哦:1.载体及目的片段的大小分别是50bp-10kb,引物设计很重要,2.两者的配比 最后就是感受态了。祝好运哦
...

两个的配比是按照说明书上的接近最优的配比来的

发自小木虫Android客户端
23楼2016-10-07 13:21:07
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匿名

用户注销 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖仅楼主可见
24楼2016-10-07 21:02:04
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qhiv6

新虫 (小有名气)

引用回帖:
24楼: Originally posted by pf790352975 at 2016-10-07 21:02:04
这种小片段很好连的  比较简单...

两个月,没连上,找不到原因

发自小木虫Android客户端
25楼2016-10-08 10:44:38
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mwang307

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 010308Jing at 2016-10-03 12:20:21
T4连接酶不需要ATP啊

错。需要ATP的,buffer里提供
纵有沧桑真冷暖温柔镜里梦难留
26楼2016-10-08 15:21:50
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一笑中

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
10ul或15ul体系,加1ul,16℃过夜即可

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27楼2016-10-08 16:19:28
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010308Jing

木虫 (正式写手)

引用回帖:
26楼: Originally posted by mwang307 at 2016-10-08 15:21:50
错。需要ATP的,buffer里提供...

额,没注意到

发自小木虫Android客户端
28楼2016-10-08 16:35:46
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010308Jing

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
26楼: Originally posted by mwang307 at 2016-10-08 15:21:50
错。需要ATP的,buffer里提供...

嗯嗯,想明白了,是需要的,要ATP提供能量

发自小木虫Android客户端
29楼2016-10-08 16:39:46
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