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萝卜变青青

新虫 (初入文坛)

[求助] 电泳跑歪的原因 已有4人参与

电泳跑的歪的乱七八糟的,求各位大神指点指点。

电泳跑歪的原因


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Freda_0829

新虫 (初入文坛)

running buffer要加满,至少高于短板,上样前可以先接点自来水检漏。另外配胶的时候要充分混匀,倒胶时枪不要打到头,防止sds产生气泡,如果有气泡,胶就会跑歪。而且倒完分离胶要压线,标准做法是用异丙醇,胶凝后用滤纸吸干,滤纸不要碰到胶,不然胶就不平了。不用每个孔都上样,但是上样量小,利于压线,胶会比较漂亮比较直。蛋白胶最好横流跑,浓缩胶一定要低电流,把蛋白逼成一条线,然后分离胶可以稍高电流,这样胶会很好看的。

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24楼2016-10-12 23:15:36
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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kuaile5420: 金币+2, 欢迎发帖交流 2016-10-02 23:51:56
萝卜变青青: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-10-03 10:04:02
1.胶制的有问题,一定要充分混匀各种成分后灌胶,制胶时,玻璃板不要压的太紧。
2.点样时,没有样品的孔里也要加等量的上样缓冲液。
3.电泳过程中,注意液面要始终高于短板。
2楼2016-10-02 13:08:59
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ttszero

新虫 (小有名气)

3楼2016-10-02 18:15:21
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cuihao102

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
萝卜变青青: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-10-03 10:04:25
如楼上,感觉是胶的问题,配胶时注意玻璃板一定要洗干净,要混匀再倒胶,缓冲液最好用新配的
4楼2016-10-02 19:10:52
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